上海生物制品内毒素检测风险评估

SHENTEK®重组级联试剂为内毒素检测高效解决方案。法规层面，符合美国药典（USP）、欧洲药典（EP）及日本药典（JP）要求，满足国际标准检测需求。抗干扰性强，与天然鲎具有相同反应机制，检测结果等效，适配复杂样本场景。特异性表现突出，不含 G 因子，避免与 β - D 葡聚糖反应产生假阳性，保障结果可靠。检测灵敏度高，线性范围达 0.005 - 5EU/mL ，可准确捕捉低浓度内毒素。反应快速，60分钟内即可完成检测，提升检测效率。兼容性佳，能兼容动态显色法的酶标仪，无需额外投入设备成本。关键的是，无动物源试剂，遵循 3R 原则（减少、替代、优化），不依赖鲎血，解决资源依赖问题，实现长期稳定供应。且通过重组表达生产，批次差异小，重复性好，稳定性高，为生物制品、制药等行业内毒素检测提供可靠、可持续的工具，助力企业把控质量，契合绿色环保与高效检测的双重需求，在保障检测准确性与合规性的同时，推动行业向更环保、更高效方向发展。

如何准备样品进行内毒素检测呢？测试前，需要根据样品实际情况进行样本前处理。大多数样品只需要稀释，使用内毒素检测试剂盒进行测试即可。如果样品有蛋白酶干扰并导致假阳性结果，建议对样品稀释并70°C加热5-15分钟进行热灭活处理。如需要，可以对灭活样品进行进一步稀释后检测。如果样品可能含有受β-葡聚糖，建议使用抗增液。β-葡聚糖可能来自酵母和纤维素材料。如果样品中因含有内毒素结合物而存在抑制，可以尝试使用分散剂。

重组级联试剂（rCR）通过完整模拟天然鲎试剂的酶促级联反应路径，实现高效且特异的内毒素检测。其反应机制为：内毒素首先活化重组 C 因子，活化的 C 因子进一步活化重组 B 因子，随后活化重组凝固酶原转化为凝固酶，再催化显色底物产生黄色信号（405nm 波长可检测）。这一级联放大过程有效提升了检测灵敏度，即使微量内毒素也能产生可识别信号。与单因子的重组 C 因子法（rFC）相比，rCR 的多因子级联反应抗干扰能力更强，尤其对复杂基质样品（如高蛋白单抗、疫苗）表现更优。同时，rCR 剔除了天然鲎试剂中的 G 因子，避免了与 β-D 葡聚糖的非特异性反应，从根本上减少假阳性结果，保障检测数据的可靠性。

内毒素检测鲎试剂的反应受pH的干扰。在进行检测时，要调节被测溶液的pH值，使鲎试剂与供试品溶液的混合溶液pH值落在鲎试剂指定的使用pH范围内（一般鲎试剂作用pH值在6.0~8.0范围内)。用于调节pH值的试液或溶液（酸或碱)，可采用BET用水配制，并将溶液在无热原容器中储存；必须对试液或溶液进行验证，以证明不含可检出的内毒素并且无干扰因素。调节pH试剂（酸或碱）的添加量，不应该超过供试品的1092。如果超过10%，则在进行计算时，将DH试剂的添加量的系数计算进去。

湖州申科生物细菌内毒素工作标准品（CSE）源自大肠杆菌（E.coli O111:B4），经过提取精制获得脂多糖，并以细菌内毒素国家标准品为基准标定效价，每支效价处于 10 - 100EU ，量值准确且可靠。在工业内毒素检测中，该标准品应用广且关键。首先，能用于鲎试剂灵敏度复核实验，帮助检测人员准确确认鲎试剂对细菌内毒素的敏感程度，保障检测方法的有效性；其次，可开展干扰试验，评估样品中可能存在的干扰物质对检测结果的影响，以便优化检测流程和方法；再者，能充当各种阳性对照，为检测过程提供参照，确保检测结果的准确性与可靠性。这款标准品不仅适用于凝胶法鲎试剂系列实验，在光度法鲎试剂系列实验中同样能发挥重要作用。使用时，只需参照中国药典2025版第四部通则 1143 的相关介绍进行操作即可。凭借效价标定准确和适用性的优势，该标准品为生物制品、化学药品等各类样品的细菌内毒素检测提供了稳定且可靠的标准，助力企业和检测机构严格把控产品质量，满足法规要求。

针对单核细胞活化反应测定法（MAT）通过检测内毒素的生物活性，有效规避低内毒素回收（LER）对內毒素检测的影响。其原理是：热原（包括被掩蔽的 LPS）活化单核细胞表面的 TLR 受体，释放 IL-6 等细胞因子，通过 ELISA 检测 IL-6 浓度，结合标准曲线推算热原含量。即使 LPS 因 LER 改变超分子结构，只要仍具生物活性，就能被 MAT 法识别。这种 “检测活性而非结构” 的特性，使 MAT 法成为 LER 场景下内毒素检测的重要补充，与其他方法协同构建高效可靠的热原防控体系。