1/2ms生长培养基的培养结果为:中双11号油菜种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100%,培养9d的幼苗,表现为植株健壮、平均株高为,叶色浓绿,茎秆粗壮、平均茎中粗为,根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。培养实例3和对比培养例3的培养结果比较:中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100%;在相同条件下培养9d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,其株高、根的数目优于1/2ms生长培养基,茎粗及平均主根长度与1/2ms生长培养基相近。如图3所示。培养实例4:马铃薯无菌苗培养生长培养基配制:1/2cs基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶8g/l,用超纯水溶解,。1/2cs基本培养基的成分及用量如表1所示。培养方法:以克新18号马铃薯为例,将配制好的1/2cs生长培养基分装于长、宽、高9cm的耐高温培养盒中,选择生长旺盛的马铃薯脱毒苗,于无菌环境下,根据实际需要,用手术剪刀剪取约1cm长的至少带有1个叶芽的茎端或茎段,用弯头镊子将其1/3-1/2长度垂直插入培养基中;于温度22-23℃、湿度50-70%、光照强度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照时间14h、黑暗时间10h)条件下培养。减血清培养基提高了实验的可重复性。浙江F12培养基价格
但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长。碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统,此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量,是在科学的基础上根据实践经验所得。但是由于不同的细胞系(株)不同,同一株细胞适应环境也可能不同(细胞耐受性不同等),且存在的地域性水质差异等,在实际生产过程中也可稍作改动,但使用者需做相应的检测(理化及细胞生产试验等)。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH~,在高浓度时对一些细胞可能**。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10~25mmol/L。**酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是在没有葡萄糖的条件下,细胞也可以代谢**酸钠。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4℃下放置1周可分解50%,使用中**好单独配制,置-20℃冰箱中保存,使用前加入细胞培养液中。中国香港F12培养基市场报价DMEM培养基在实验室中广泛应用于细胞实验。
这些重组蛋白和动物来源成分对生物制品的安全性有很大影响。成本低。主要用途应用案例采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM(SLM)低血清培养基分别培养Vero细胞、BHK21细胞和CHO细胞,新生牛血清用量可以从10%降至3%,减少新生牛血清使用批次和批间差的影响,减少生物制品纯化损失,减少由于不确定蛋白或者其它血清组分带来干扰和差异的风险,提高制品安全性。低血清培养基可以在方瓶、3L转瓶、15L转瓶及生物反应器中培养细胞,在*苗生产中可以达到低血清高密度的培养效果。低血清培养基营养成分优于基础培养基,易使细胞增殖迅速,代谢旺盛,代谢产物对细胞有不良影响,易产生细胞老化脱落现象。因此需要适当增加换液次数,增加传代频率。获取同样的细胞量,用低血清培养基将比用传统培养基缩短近1/3的时间,可提高生产效率。采用199(SLM)低血清培养基培养Vero细胞分泌狂犬*苗病毒,滴度明显高于采用199培养基传统培养获得的滴度。采MEM(SLM)低血清培养基BHK21细胞,在本实验情况下12代内细胞形态和致密度均优于MEM培养基传统培养情况,因而可以预期其产生的口蹄*、甲肝等*苗生产的病毒产量将提高。低血清培养基用于反应器Vero细胞狂犬*苗的生产,实践证明效果良好。采DMEM。
以及无血清培养的基础细胞培养基。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计,含有BSS、21种氨基酸、维生素等,***适于多种正常细胞和肿*细胞的培养,也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素,可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞,也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后营养成份丰富,血清使用量也减少。常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。与天然培养基相比,有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代,因此,细胞培养中使用合成培养基时必须加入一定量的天然培养基成分,以克服合成培养基的不足。**普遍的做法是添加5~10%的血清,这样才能维持细胞活力,促进细胞增殖。针对不同的动物细胞,现已开发了多种商业化、个性化的低血清细胞培养基配方,营养成份更加丰富,血清使用量可降低至1~3%,由此可减少了血清等动物来源成份对生物制品安全性的影响。(serumfreemedium,SFM)经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免**污染造成的危害。F12培养基确保了实验结果的一致性和可靠性。
附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图,a:无菌苗在培养基中生长情况;b:无菌苗莲座叶及根系发育;c:萌发率;d主根长度;a和b中bar=;图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上,兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌植株地上部分及根系发育;c:无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右);d:主根长度;e:株高;f:莲座叶长度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上,油菜无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:主根长;f:大于;a中bar=、b中bar=;图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上,马铃薯无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:根数;a和b中bar=;图5是cs和ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图,a:叶片愈伤**;b:叶片愈伤**诱导率;c:根愈伤**;d:根愈伤**诱导率;a和c中bar=;图6是cs和ms两种培养基上。RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。山西Ham's F12培养基供应商
DMEM高糖培养基能够促进肿瘤细胞的快速增殖。浙江F12培养基价格
本发明涉及植物**培养技术领域,特别涉及一种植物**培养基。背景技术:ms培养基于1962年由murashige和skoog设计,是目前植物**培养中应用**为***的培养基。据《危险化学品安全管理条例》(***令第591号)、《民用物品安全管理条例》及《易制爆危险化学品名录》(2017年版)可知,ms培养基的主要成分硝酸钾、硝酸铵均为易制爆管制试剂,随着**监管越发严格,所有易制爆试剂的购买、储存及使用变得越来越困难,尤其是兼有硝态氮和铵态氮的硝酸铵,其纯品被禁止市场流通,为植物**培养带来很大难度。b5培养基于1968年由gamborg等为培养大豆根细胞而设计,n6培养基于1974年由朱至清等为水稻等禾谷类作物花*培养而设计,两者均由ms培养基衍生而来,在有些植物**培养研究中***应用,虽然b5和n6培养基除了硝酸钾外不含其他易制爆成分,但两者中的钙离子和镁离子含量均大幅降低,且b5培养基中铵离子大幅减少、n6培养基中钾离子大幅增加,这些离子浓度的大幅波动对一些植物的**培养是不利的。cna草莓增殖培养基公开了一种无硝酸铵培养基,但其硝酸钾及**铵含量过高,*适用于草莓**培养;cna一种草莓**培养基及其配制方法公开了一种无硝酸铵培养基,在草莓**培养中取得很好的效果。浙江F12培养基价格