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本发明属于氨基酸生产技术领域:,具体涉及一种优化的谷氨酸发酵培养基。背景技术::谷氨酸,是一种酸性氨基酸。分子内含两个羧基,化学名称为α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索逊1856年发现的,为无色晶体,有鲜味,微溶于水,而溶于盐酸溶液,等电点。大量存在于谷类蛋白质中,动物脑中含量也较多。谷氨酸在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位,参与动物、植物和微生物中的许多重要化学反应。谷氨酸钠俗称味精,是重要的鲜味剂,对香味具有增强作用。谷氨酸钠***用于食品调味剂,既可单独使用,又能与其它氨基酸等并用。用于食品内,有增香作用。在食品中浓度为,每人每天允许摄入量为0-120微克/千克(以谷氨酸计)。在食品加工中一般用量为-。谷氨酸主要以微生物发酵制备而得,通过优化发酵培养基,使得菌体增殖速率提高,可以提高氨基酸的产量。现有技术对谷氨酸发酵培养基优化进行了大量的研究,例如文献1“基于pb试验和响应面分析法对谷氨酸棒杆菌cnl021发酵培养基优化,**酿造2014年”,通过**陡爬坡试验和响应面分析法对发酵培养基组成进行优化,得到谷氨酸棒杆菌**适发酵培养基组,较未优化培养基的发酵培养基产酸量提高了。安徽DMEM高糖培养基哪家好减血清培养基减少了血清成分的变异性。
1)、初代培养:绣球外植体,将叶片剪去,自来水冲洗干净。在超净工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75%酒精中消毒30s,用无菌水冲洗3~4次。使用白猫漂白水和无菌水按1:4的体积比配制消毒液,将外植体放入消毒液浸泡40min,其中白猫漂白水为上海白猫(集团)有限公司生产的“白猫”牌家用漂白水。消毒完成,将外植体接种到诱导培养基中培养,建立无菌再生系统,诱导培养环境为光照强度1500lx条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养6~8周。其中诱导培养基为ms+~~,诱导培养基的ph值为。(2)、继代培养:以建立的无菌再生系统为对象,将无菌外植体转接到增殖培养基,其中增殖培养基为ms+~~,培养环境为光照强度1500lx条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养8~12周。每隔8~12周转接入新的增殖培养基,增殖培养基的ph值为。(3)、生根培养:经过继代培养的绣球组培苗,取2~3cm的顶芽,放入生根培养基,其中生根培养基为1/2ms+~~,生根培养基的ph值为。诱导培养环境为光照强度1500lx条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养8~12周。。
愈伤**诱导率为100%。如图6所示。对比培养例6:将cs基本培养基替换为ms基本培养基,其余完全同培养实例6,ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为:本氏***叶片愈伤**诱导时,培养15-18d的叶片略微增厚,在叶片四周产生较少的淡绿色愈伤**,愈伤**诱导率为90%,在愈伤**团块上产生的嫩绿色不定芽数量较少;本氏***根愈伤**诱导时,培养9-11d在切口处产生大量淡黄色致密的愈伤**,愈伤**诱导率为100%。如图6所示。培养实例6和对比培养例6的诱导结果比较:用上述方法进行本氏***叶片愈伤**诱导时,cs诱导培养基愈伤**诱导率为100%,而ms诱导培养基的诱导率*为90%,在所述相同培养条件下,与ms诱导培养基相比,cs诱导培养基可更快诱导出大量致密的叶片愈伤**、产生更多的不定芽;用上述方法进行本氏***根愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的根愈伤**形态相近,两种培养基的根愈伤**诱导率均为100%。如图6所示。培养实例7:水稻成熟胚愈伤**诱导(1)水稻种子消毒及筛选:a、选种:以籼稻缙恢10号为例,将水稻种子晾晒干燥后于4℃下长期保存,挑选籽粒饱满、大小基本一致的水稻种子,用剪刀从种子中部剪开,去除谷壳。F12培养基适用于复杂细胞培养实验。
本发明涉及植物**培养技术领域,特别涉及一种植物**培养基。背景技术:ms培养基于1962年由murashige和skoog设计,是目前植物**培养中应用**为***的培养基。据《危险化学品安全管理条例》(***令第591号)、《民用物品安全管理条例》及《易制爆危险化学品名录》(2017年版)可知,ms培养基的主要成分硝酸钾、硝酸铵均为易制爆管制试剂,随着**监管越发严格,所有易制爆试剂的购买、储存及使用变得越来越困难,尤其是兼有硝态氮和铵态氮的硝酸铵,其纯品被禁止市场流通,为植物**培养带来很大难度。b5培养基于1968年由gamborg等为培养大豆根细胞而设计,n6培养基于1974年由朱至清等为水稻等禾谷类作物花*培养而设计,两者均由ms培养基衍生而来,在有些植物**培养研究中***应用,虽然b5和n6培养基除了硝酸钾外不含其他易制爆成分,但两者中的钙离子和镁离子含量均大幅降低,且b5培养基中铵离子大幅减少、n6培养基中钾离子大幅增加,这些离子浓度的大幅波动对一些植物的**培养是不利的。cna草莓增殖培养基公开了一种无硝酸铵培养基,但其硝酸钾及**铵含量过高,*适用于草莓**培养;cna一种草莓**培养基及其配制方法公开了一种无硝酸铵培养基,在草莓**培养中取得很好的效果。减血清培养基减少了血清中的未知因素对细胞的影响。福建培养基进口
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