海南MEM a培养基

    文献2“混合硝酸稀土对谷氨酸产生菌的影响，氨基酸杂志”发现，在发酵培养基中添加一定量的稀土元素，能够提高谷氨酸的产量。申请人之前的**技术“一种谷氨酸发酵培养基制备方法”，在常规培养基的基础上进行了改进，通过添加菌体蛋白浸膏来替代酵母膏氮源，不但节约了成本，还能提高氨基酸发酵产率，一举两得。技术实现要素：在已有发酵培养基的基础上，申请人针对微生物发酵的特点，继续进行了改进，以提高发酵效率，据此，提出了一种优化的谷氨酸发酵培养基。本发明是通过如下技术方案来实现的：一种优化的谷氨酸发酵培养基，其包括发酵培养基a和发酵培养基b；所述发酵培养基a首先添加，然后间隔12h以上添加发酵培养基b。进一步地，所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖，酵母浸膏，k2hpo4，mgso4·7h2o，2-羟基乙胺，cecl3，mnso4·h2o，feso4·7h2o，vb1，生物素；将各原料搅拌均匀后，调节ph，**，制得发酵培养基a。进一步地，所述发酵培养基b的制备方法为：取各原料：琥珀酸，尿素，壳聚糖；将各原料搅拌均匀后，调节ph，**，制得发酵培养基b。推荐地，所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖50-100g/l，酵母浸膏10-30g/l，k2hpo41-5g/l。MEM培养基在细胞培养中表现出高效的稳定性。海南MEM a培养基

    按中华******典2005年版二部附录ⅧL干燥失重测定法进行。渗透压溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，称为渗透压。细胞必须生活在等渗环境中，动物细胞借助K＋、Na＋维持渗透平衡。大多数细胞对渗透压有一定的耐受性。但是培养液渗透压过高容易使细胞脱水萎缩，培养液渗透压过低容易使细胞膨胀破裂，因此要控制培养基的渗透压范围。按中华******典2005年版二部附录ⅨG渗透压摩尔浓度测定法进行。**内*****内***是许多病原性**所产生的***。它的特殊性在于不是**或**的代谢产物，而是**死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。培养基**内***过高，对生物制品*苗（如狂犬、乙肝*苗）、基因工程*品等注射用的*品都需要检查**内***。因此本项目的检验符合生物制品质量控制要求。常规细胞培养基的**内***标准定为＜10EU/ml。称取本品规定量（见表4-12）的1/100，加入**内***检查用水10mL溶解，吸取该溶液mL加**内***检查用水mL，混匀即得试样。按中华******典2005年版二部附录ⅪE**内***检查法中的凝胶法进行。微生物限度细胞培养基不是无菌产品，其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖。河北DMEM/F12培养基哪个好RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。

    第三节培养基的高压**及效果验证消毒**在医学实践上有着重要意义。它可切断传播途径、控制***扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的**，防止医院***；在医学微生物检验的领域中，消毒**是保正***的病原学检验不受外来微生物污染的前提。（一）术语消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐（antisepsis）和无菌(asepsis)是常用术语。下面就术语概念加以叙述。(1)**。是用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的**。（如外科器械、注射器、基础培养基**等。）(2)消毒。是破坏物体上活的病原微生物的方法，但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、新洁尔灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消毒剂(dis-infectant)。一般而言，消毒对象是指物体而不是机体。(3)防腐。直接使用防腐剂(antiseptics)破坏或**活的病原微牛物的方法。如外科手术前碘液擦洗皮肤、双氧水清创伤口或**肥皂清冼双手等。(4)无菌。防止***病原体进入****或物品的操作技术称无菌操作。无菌即为不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有热力、电离辐射、超声波、过滤等。

    培养实例2和对比培养例2的培养结果比较：兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100％；在相同条件下培养28d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，在平均株高、莲座叶大小、根长、花朵数量等方面均优于1/2ms生长培养基；并且，采用上述培养方法，不论是1/2cs生长培养基还是1/2ms生长培养基，均能获得形态完整的花粉，且花粉活力高达％，其特点在于选择了兰兹贝格型拟南芥作为培养对象，且选择了高度适中的培养盒进行培养，克服了传统培养方法无法获得拟南芥整个生育期无菌苗的缺点，所获无菌花***可直接用于花*离体培养等研究内容。如图2所示。培养实例3：油菜无菌苗培养与培养实例1不同的地方在于：步骤(1)所用种子为中双11号油菜种子，其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为：中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100％，培养9d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，叶色浓绿，茎秆粗壮、平均茎中粗为，根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。对比培养例3：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例3，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。F12培养基常用于神经细胞和其他敏感细胞系。

    培养实例7和对比培养例7的诱导结果比较：：用上述方法进行水稻成熟胚愈伤**诱导时，cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的愈伤**形态大小均相近，出愈率均为100％。如图7所示。培养实例8：液体培养基在植物水培中的应用(1)用不同ph的超纯水配制的液体培养基ph值稳定性比较：a、用不同ph的超纯水配制液体培养基：通常多种因素会导致相同超纯水制水机产出的超纯水ph变动较大，ph通常为。分别选取ph为、、、、、，分别配制ms液体培养基、cs液体培养基、1/2ms液体培养基、1/2cs液体培养基，制作方法为：ms液体培养基为取ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；cs液体培养基为取cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；1/2ms液体培养基为取1/2ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；1/2cs液体培养基为取1/2cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l。b、结果为：用ph为，ms液体培养基ph为，cs液体培养基ph为，1/2ms液体培养基ph为，1/2cs液体培养基ph为。植物**适宜生长的ph一般为，观察可知，ms液体培养基及1/2ms液体培养基的ph偏酸性且波动较大，其应用于液体培养基时通常需要调节ph，过程繁琐，相比之下。MEM培养基提供了细胞生长所需的基本环境。辽宁基础培养基常用知识

减血清培养基在减少实验误差方面表现出色。海南MEM a培养基

    可通过在细胞培养基中添加一些保护剂，降低细胞-气体和细胞-液体的表面张力，减少气泡的形成。4.细胞培养基的**及储存**方式及注意事项细胞培养基**的方式分为高压**和膜过滤**，不同的培养基由于其营养成份不同，**方式也可能不同。①高压**某些培养基（如MEM）可进行高压**，这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，一般是在培养基高压**后才加入。另外可用耐高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺。可高压**的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到**效果及营养成分的**小损失，不需将**时间延长。绝大多数细胞培养基不适宜高压**。因培养液中常含有维生素、蛋白质、多肽、生长因子等物质，这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多采用过滤消毒以除去**。可供过滤**使用的滤膜很多，其材料多为polyethersulphone（PES）、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。膜过滤**是当前较为常用及便捷的一种方法，常采用μm孔径的滤膜，部份采用μm孔径。与高压过滤方式相比，滤膜具有使用期限且价格较高，但对细胞培养基的营养成份破坏性较小。通常液体细胞培养基避免-20℃冻存。海南MEM a培养基