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外泌体基本参数
  • 品牌
  • 苏州英泽生物医药科技有限公司
  • 型号
  • 型号齐全
外泌体企业商机

外泌体是直径为30-150nm的小细胞外囊泡。在生理和病理条件下,几乎所有类型的细胞都可以释放外泌体,在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用。外泌体天然存在于体液中,包括血液,唾液,尿液和脑脊液等,内部含有其来源细胞的核酸,蛋白等物质,因此基于外泌体的疾病诊断和治着方法得到了深入的研究。但是如何拿到纯净的外泌体一直是外泌体研究所面临的难题之一,因此研究人员也开发了许多外泌体分离的方法,来一起看一下吧。差速离心法:离心力从300×g到100,000×g的下进行多次循环离心,较后收集外泌体颗粒。密度梯度离心法:等密度梯度超速离心法是通过从下到上逐步降低密度分层。动区梯度超速离心法由两个梯度介质部分组成,样品根据密度/质量/大小被依次分离。外泌体富集、分离和检测是当前外泌体研究的热点之一。重庆外泌体分离芯片检测

外泌体的表征分析:Zeta电位:通过电泳光散射(ELS)测量的Zeta电位测量粒子在电泳场中的速度。Zeta电位是胶体分散体稳定性的指标(非常值)和囊泡表面电荷的量度(+或-符号)。电子显微镜分析:对于电子显微镜分析,外泌体制剂在PBS缓冲液中按1:10稀释,随后在等体积的4%(w/v)多聚甲醛和1%(v/v)戊二醛中固定5分钟。然后将样品置于formvar-carbon涂层的600目铜网格上,并在室温下干燥5分钟。随后将样品在乙酸双氧铀溶液(2%水溶液)中进行对比,并在电子显微镜(Jeol1230TEM)下观察,加速电压为80kV,并连接到数码相机进行观察。福州尿液外泌体生产商外泌体不是干细胞,是干细胞较精华的部分。

外泌体可以传递生物分子,例如蛋白质、DNA、mRNA等,影响接收器细胞的表现型和生理活性。外泌体可通过特定的组装和功能修饰,提高其对宿主细胞的选择性靶向性。核酸是在外泌体中发现的另一组主要颗粒,即DNA和RNA,它们可以在细胞中发挥功能作用。在源自小鼠和人类肥大细胞的外泌体中发现了约1300种mRNA、121种miRNA和>100种小RNA,但未检测到DNA和rRNA。在外泌体中发现的其他miRNA是lin-4和let-7,以及母乳中的miR-181a和miR-155。小鼠外泌体对人类细胞的刺激可以导致人类细胞中小鼠蛋白质的合成。此外,外泌体和受体细胞的mRNA谱不同,表明mRNA被主动分选为MVB。

分离外泌体的方法之降水:它是一种基于生物体液中外泌体的电荷沉淀的方法。带负电荷的外泌体可以与PEG35,000Da基质中带正电荷的鱼精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌体的回收和重悬比基于超速离心的分离更有效。聚合物沉淀法以更少的劳动力和昂贵的设备分离尿外泌体的潜在益处。该方法首先利用DL-二硫苏糖醇溶液还原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合网络,然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可实现外泌体的沉淀。还有利用聚合物沉淀方法并消除超速离心的商业试剂盒。ExoQuick™、Exo-spin™是来自Invitrogen™和miRCURY™的市售总外泌体分离试剂。未来可开发更加高效和精确的外泌体分离和检测技术。

外泌体的表征方法之非光学方法:非光学方法主要包括扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、冷冻电子显微镜(Cryo-EM)、原子力显微镜(AFM)、免疫检测方法(ELISA)、傅立叶变换红外光谱(FTIR)、可调谐电阻脉冲传感(TRPS)和单粒子干涉反射成像传感器(SP-IRIS)。SEM、TEM和AFM方法通常用于直接膜结构和形态测定,而ELISA检测提供各种结构颗粒(主要是蛋白质和受体)的检测和量化,例如,用于外泌体形态的确认。单粒子干涉反射成像传感器(SP-IRIS)也用于外泌体定量,但也可用于检测特定标记物和确定外泌体亚群。外泌体与神经系统的关系复杂,通过在神经元间的转移,参与多种神经疾病的发生和病理机制的形成。重庆外泌体分离芯片检测

外泌体在人体的主要作用是充当局部和全身信号和调节系统。重庆外泌体分离芯片检测

外泌体分离方法之免疫学分离方法:免疫学分离法是利用受位于外泌体膜中的选定蛋白质标记物影响的抗体对外泌体进行标记。这些标记的外泌体可以进一步轻松处理和纯化,例如,使用微芯片或磁珠。磁分离后,外泌体被纯化,磁珠被溶解和去除。通过这种简单快速的方法,就可以获得较高纯度提取物,但不会分离出缺乏磁性标记抗体识别的表面标记的外泌体,这可能导致外泌体池表现效果不佳。这种方法虽然既省时又直接,输出纯度较高,但也需要较为昂贵的试剂。重庆外泌体分离芯片检测

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