当各种内源性和外源性DNA损害因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中，而核DNA因为分子量太大只能留在原位。在中性条件下，DNA可进入凝胶发生搬迁，而在碱性电解质的作用下，DNA发生解螺旋，损害的DNA断链及片段被释放出来。因为这些DNA的分子量小且碱变性为单链，所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极搬迁构成“彗星”状图像，而未受损害的DNA部分保持球形。DNA受损越严重，发生的断链和断片越多，长度也越小，在相同的电泳条件下搬迁的DNA量就愈多，搬迁的距离就愈长。通过测定DNA搬迁部分的光密度或搬迁长度就可以测定单个细胞DNA损害程度，然后确认受试物的作用剂量与DNA损害效应的联系。彗星试验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性，研究的细胞不需处于有丝分裂期。一起，这种技术只需要少数细胞。斑马鱼繁殖迅速，遗传学实验利用此特性，短期内构建多样基因模型，加速遗传规律探寻。中国武汉斑马鱼资源中心
斑马鱼的皮肤结构和功用与人类高度类似，含有基底层、棘层、颗粒层、通明层和表皮角质细胞层。因而，业内普遍认为以斑马鱼胚胎为试验基础的结果，在一般情况下适用于人体，可对化妆品功效宣称进行检测评价，例如抗氧化、抗糖基化、抗老、淡斑亮肤等等。依据已存案成功的案例显示，若不包含前期准备的时间，只是上样检测到出具结果，斑马鱼检测的周期要比其他检测方式周期更短且本钱更低。另外，依据欧盟动物保护法，出生5天以内的斑马鱼胚胎和幼鱼不属于动物，能够代替哺乳动物测试，契合3R（代替、减少、优化）原则。因而，斑马鱼检测在动物福利层面也契合了年代潮流。斑马鱼微注射量斑马鱼胚胎发育迅速，24小时内成形，适合用于病理演化过程及病因研究。
【试验方案】咱们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内）。皮肤吸收供试品一段时间后，咱们通过中性粒转基因荧光斑马鱼，调查皮肤/肌肉刺激性；通过表型拍照，调查肌肉纹理及皮肤色素变化；通过AO染色凋亡细胞，调查皮肤细胞凋亡情况。【评价结论】1.通过每组30尾斑马鱼的比照试验，供试品组的斑马鱼皮肤肌肉发生显着的毒性表型（包括肌肉纹理反常和色素反常），在斑马鱼尾部可见显着的凋亡细胞，在躯干部可见显着的中性粒细胞合集。2.本试验证实了该供试品对斑马鱼有皮肤肌肉毒性。
斑马鱼胚胎急性毒性实验已成为全球药物安全性评价的“金标准”。美国FDA批准的Zebrafish Embryo Acute Toxicity Test（ZFET）方法，通过96小时暴露期观察胚胎死亡率、畸形率及孵化率，可替代部分哺乳动物急性毒性实验。数据显示，斑马鱼胚胎对药物肝毒性的预测准确率达89%，较传统细胞实验灵敏度提升25%。某跨国药企在抗ancer药物筛选中，利用斑马鱼胚胎模型发现，一种靶向BRAF突变的化合物在低浓度下即导致胚胎心脏水肿，而该毒性在体外细胞实验中未被检出，避免了后续临床前研究的资源浪费。高通量筛选利用斑马鱼幼鱼，能快速评估大量化合物的生物活性。
在重金属污染评估中，斑马鱼胚胎的金属硫蛋白（MT）基因表达调控机制展现出独特优势。当水体中镉离子浓度超过5μg/L时，斑马鱼胚胎肝脏区域MT基因表达量在6小时内可上调20倍，该生物标志物较传统化学检测法响应时间缩短80%。某研究团队利用斑马鱼胚胎阵列技术，同时检测了电子垃圾拆解区水样中铅、汞、镉等12种重金属的复合毒性，发现实际毒性效应较单一金属检测结果高5-8倍，揭示了传统检测方法的局限性。斑马鱼胚胎的透明特性使得其神经管发育畸形、血管生成异常等表型可直接观测，为污染物致畸效应研究提供了可视化证据。化学诱变剂处理斑马鱼，可建立特定基因突变疾病模型。斑马鱼研发系统多少钱
单细胞测序技术解析斑马鱼细胞异质性，揭示发育调控网络。中国武汉斑马鱼资源中心
在药物代谢动力学研究方面，斑马鱼幼鱼展现出独特优势。其肝脏代谢酶（如CYP3A65）与人类CYP3A4同源性达76%，且肠道屏障功能尚未完全建立，使得药物吸收、分布、代谢过程可视化。瑞士诺华公司通过LC-MS/MS技术检测斑马鱼幼鱼体内药物浓度，发现某新型kang生素的生物利用度较传统模型预测值高18%，该差异源于斑马鱼肠道中特异性转运蛋白的表达差异。这一发现促使药物剂型设计优化，使候选药物在II期临床试验中的疗效提升30%。斑马鱼在中药毒性研究中的应用日益宽泛。中国中医科学院团队通过斑马鱼胚胎热休克蛋白（Hsp70）启动子驱动荧光报告基因，构建了中药肝毒性的实时监测系统。实验显示，含马兜铃酸的中药复方可使斑马鱼胚胎肝脏区域荧光强度在24小时内增加5倍，而传统生化检测需72小时才能达到相同灵敏度。该技术已应用于中药材质量控制，成功识别出多批次含微量肾毒性成分的饮片，为中药国际化提供了科学依据。中国武汉斑马鱼资源中心
