四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的固体培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化钠:5.0g-无水亚硫酸钠:3.0g-十二烷基硫酸钠:0.5g-猪胆汁粉:5.0g-雷佛奴尔:0.03g-庆大霉素:500U-琼脂:15.0g-pH值约为8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍乱弧菌的选择性分离培养。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉,加入到1L蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-冷却至50-55℃时,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。-待凝固后备用。4.**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子。-氯化钠维持均衡的渗透压。-亚硫酸钠可刺激弧菌生长。-柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、牛胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌。-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长。-琼脂是培养基的凝固剂。细菌保存培养基的基本原理是通过降低细菌的新陈代谢速度,使细菌的生命活动处于半永久性的休眠状态。改良TJA预装培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
SH培养基(Schenk&HildebrandtMedium)是一种用于植物组织培养的培养基,特别适合于单子叶和双子叶植物细胞的悬浮培养。它含有相对较低的铵盐和较高的硝酸盐,以及丰富的维生素和无机盐,适合许多植物种类的生长。**配方组成**:-硝酸钾(KNO3):2500.00mg/L-磷酸二氢铵(NH4H2PO4):300.00mg/L-氯化钙(CaCl2·2H2O):200.00mg/L-硫酸镁(MgSO4):195.34mg/L-硫酸锰(MnSO4·H2O):10.00mg/L-硼酸(H3BO3):5.00mg/L-碘化钾(KI):1.00mg/L-钼酸钠(Na2MoO4·2H2O):0.10mg/L-硫酸锌(ZnSO4·7H2O):1.00mg/L-硫酸铜(CuSO4·5H2O):0.20mg/L-氯化钴(CoCl2·6H2O):0.10mg/L-硫酸亚铁(FeSO4·7H2O):15.00mg/L-EDTA二钠(Na2EDTA·2H2O):20.00mg/L-肌醇(myo-Inositol):1000.00mg/L-盐酸硫胺素(Thiaminehydrochloride):5.00mg/L-盐酸吡哆醇(Pyridoxinehydrochloride):0.50mg/L-烟酸(Nicotinicacid):5.00mg/L-蔗糖(Sucrose):20000.00mg/L**配制方法**:1.用600ml灭菌后的蒸馏水溶解脱水培养基,用少量蒸馏水冲洗残余培养基粉末。2.轻轻搅动使培养基完全溶解。3.加入所有热稳定添加剂。
牛津琼脂(OXA)基础的pH值对李斯特氏菌的生长有影响。李斯特氏菌的适生长pH值为7.0±0.2(25℃),这与牛津琼脂(OXA)基础的pH值相匹配。在这个pH值下,李斯特氏菌能够良好地生长并表现出其特有的生物学特性,如β-溶血和七叶苷的水解。pH值对微生物生长至关重要,因为它可以影响:1.**酶活性**:许多微生物的代谢酶在特定的pH值范围内活性高。2.**细胞膜功能**:pH值的变化可能会干扰细胞膜的完整性和功能,影响营养物质的吸收和废物的排出。3.**代谢途径**:pH值的变化可能会改变微生物的代谢途径,从而影响其生长和繁殖。牛津琼脂(OXA)基础中的pH值是通过添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分来维持的,这些成分不仅提供碳氮源、维生素和生长因子,还有助于维持培养基的pH值。如果pH值偏离了范围,可能会抑制李斯特氏菌的生长,或者导致其他非目标微生物过度生长,影响结果的准确性。因此,为了确保牛津琼脂(OXA)基础能够准确地分离和培养李斯特氏菌,实验室人员需要仔细控制和监测培养基的pH值。KI培养基有上层和下层培养基。上层培养基成分有血消化汤、琼脂、硫代硫酸钠、硫酸亚铁铵、乳糖和酚红溶液。
嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一种专门用于灭菌与消毒鉴定试验的微生物培养基。以下是它的一些主要特点和用途:1.**配方成分**:该培养基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和琼脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可发酵的糖类,作为碳源;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值为7.1±0.2(25℃),为嗜热脂肪杆菌的生长提供了适宜的环境。3.**用途**:主要用于灭菌与消毒鉴定试验,通过观察嗜热脂肪杆菌在该培养基上的生长情况来判断灭菌和消毒的效果。4.**使用方法**:称取35g培养基粉末,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,然后在115℃下高压灭菌30分钟。5.**质量控制**:使用嗜热脂肪杆菌ATCC7953作为质控菌株,培养条件为56±1℃,24小时,生长率应达到PR≥0.7,表现为生长良好。6.**储存条件与保质期**:贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。7.**注意事项**:在称量时应注意防尘,佩戴口罩操作以避免呼吸道不适;使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块;质检报告可以登录相关网站下载。普通肉汤培养基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化钠和水组成,这些成分为细菌提供必需的碳源等。DG-18琼脂培养皿
水琼脂培养基主要由琼脂和水组成,是一种基础培养基,可以为微生物提供生长所需的基本环境。改良TJA预装培养皿
DPD培养基(DPDMedium)是一种用于植物组织培养的培养基,其特点是全无机盐配方,适用于多种植物细胞的培养。以下是DPD培养基的一些关键特点:1.**成分**:DPD培养基包含多种无机盐和有机物,如硝酸铵、硫酸钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸二氢钾、硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)、硫酸锰、钼酸钠、硼酸、硫酸锌、硫酸铜、氯化钴、碘化钾、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、肌醇、叶酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激动素等。2.**pH值**:培养基的pH值调整至5.8,以满足植物细胞生长的需要。3.**用途**:DPD培养基主要用于植物组织的培养,包括植物细胞、组织的生长和发育。4.**配制方法**:通常称取一定量的DPD培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,分装后进行高压灭菌。5.**保存条件**:DPD培养基的保质期通常为三年,应避光、干燥保存,或根据需要保存于2-8°C。6.**注意事项**:在使用时,应检查培养基是否有颜色变化、蒸发/脱水情况或微生物生长。培养基融化后应立即使用,避免重复融化和长时间放置。7.**用法**:在使用前,需要调整pH值至5.8,并进行高压灭菌处理。DPD培养基因其成分稳定和适用性广,在植物组织培养领域有着广泛的应用。 改良TJA预装培养皿