外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体***于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。外泌体被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。外泌体研究整体解决方案_英瀚斯生物。重庆比较好的外泌体测序

外泌体的临床应用:1.在疾病诊断中的应用潜能:外泌体存在于所有的生物体液中,并由所有细胞分泌,这使得外泌体在液体活检中具有吸引力,可用于纵向取样跟踪疾病进展。外泌体的生物发生可以捕获复杂的细胞外和细胞内分子,可用于***的、多参数的诊断检测。外泌体的表面蛋白也有助于其免疫捕获和富集。外泌体诊断应用的重点疾病包括心血管病、影响***系统的疾病和**。这项努力正在迅速扩展到肝脏、肾脏和肺部的其他疾病。2.在疾病***中的应用潜能:外泌体向病变细胞运送功能物质的特性有利于它们作为***载体。与脂质体相比,外泌体的免疫***率低。此外外泌体已被证实且具有良好的耐受性,无明显副作用重庆比较好的外泌体测序外泌体(Exosomes)鉴定+外泌体示踪方法 南京英瀚斯生物。

外泌体在免疫系统中的作用复杂且多样,不同来源的外泌体可能具有截然不同的免疫调控效应。例如,树突状细胞分泌的外泌体可以呈递抗原并***T细胞,具有促进免疫反应的作用;而**来源的外泌体则可能通过表达PD-L1等分子抑制T细胞活性,从而实现免疫逃逸。此外,干细胞来源的外泌体(如间充质干细胞外泌体)也常被发现具有***、免疫抑制特性,广泛应用于自身免疫病、***移植等领域的研究。这些现象提示我们,在考虑外泌体应用时,必须关注其来源细胞类型及所处的生理状态,才能准确预测其免疫调节方向。
外泌体的分离与鉴定技术是研究和应用的关键步骤,目前常用方法包括超速离心、密度梯度离心、免疫亲和捕获、聚合物沉淀等。其中超速离心法是**经典也是使用**广的方法,能够较好地富集外泌体,但操作复杂、时间长,且容易混杂微囊泡或细胞碎片。近年来,基于商业试剂盒的聚合物沉淀法由于操作便捷、效率较高,也***用于临床样本的初筛研究。而为了提高纯度和特异性,免疫磁珠捕获法结合外泌体特异性表面蛋白(如CD63、CD81等)逐渐成为高通量检测的重要手段。外泌体的鉴定通常需要借助透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)和Westernblot等方法综合判断。外泌体提取,超离法是比较常用的外泌体纯化手段。

外泌体中发现了一种特定的内泌体蛋白质亚群,表明外泌体发育过程中存在分选机制。转运所需的内体分选复合物(ESCRT)被普遍 认为是调控和引导特定分子进入MVBs腔内囊泡的途径。ESCRT,其4个主要复合物(ESCRT0,I,II,和III)负责传递用于溶酶体降解和蛋白质回收的泛素化蛋白。比较近的研究表明,特异性ESCRT家族蛋白的缺失可以改变外泌体的蛋白质含量和细胞释放外泌体的速率。更有趣的是,ESCRT系统的组件,如TSG101和Alix,被发现富集于外泌体,因此被用作外泌体鉴定的标记物。外泌体组学_外泌体测序 南京英瀚斯生物。陕西靠谱的外泌体提取
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外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白,是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合,有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现于早期以及回收的核内体中,RAB7 和 RAB9主要出现于晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白(包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。重庆比较好的外泌体测序