外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30-150nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;外泌体携带有多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。首都医科大学附属北京佑安医院李伟华等人在MolecularCancer杂志发表的有关外泌体研究的综述:分别介绍了1、外泌体在慢性乙型肝炎至肝细胞*过程中的作用2、外泌体与肝细胞*的关系3、外泌体在肝*诊断和预后中的应用4、外泌体在肝****中的应用,对相关涉及的***研究内容进行总结以揭示外泌体在肝*的发***展,诊断和***中的重要性,为研究人员进一步阐明外泌体在肝*中的作用机制,并促进外泌体在临床诊断中的应用和肝*的***提供参考。外泌体检测服务 [南京英瀚斯] 一站式外泌体检测服务平台。新疆哪家做外泌体提取
外泌体鉴定分为三个层面:透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、Nanosight粒径、蛋白标志物。透射电镜分辨率为0.1~0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,可观测样本中是否存在外泌体样结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形),同时可测量外泌体大小。外泌体表面存在特异性标志物分子,如CD9、CD81、CD63等。以琳生物可以提供Western blot和流式细胞术的鉴定结果。外泌体(Exosome)参与细胞之间的交流,物质的运输以及正常生理过程的维持、还与许多疾病息息相关。福建细胞外泌体检测外泌体实验,就找南京英瀚斯。
外泌体表面有其特异性标记物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点,但是效率低,外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验,难以***普及。外泌体是大多数细胞分泌的40 - 150nm的膜泡,存在于细胞培养基、血浆、血清、唾液、尿液、羊水和恶性腹水等生物液体中。外泌体检测可找英瀚斯生物,测序、电镜、粒径分析都可做。
外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是超速离心法,这是外泌体提取比较常用的方法。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块,由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二是过滤离心,这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法,用此种方法分离到的外泌体纯度高,但是前期准备工作繁杂,耗时,量少。四是免疫磁珠法,这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备,但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性,不便进行下一步的实验。五是PS亲和法,该方法将PS(磷脂酰丝氨酸)与磁珠结合,利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似,获得的外泌体形态完整,纯度比较高。由于不使用变性剂,不影响外泌体的生物活性,外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法比较新数据,表明PS法可提取相当高纯度的外泌体外泌体提取,超离法是比较常用的外泌体纯化手段。
外泌体鉴定:双层囊膜结构是外泌体重要标志之一,但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜(Transmissionelectronmicroscope,TEM)分辨率可达0.1~0.2nm,可将被观察物体放大至数百万倍,非常适合进行外泌体双层囊膜超微结构观测。英瀚斯生物技术团队拥有丰富的外泌体电镜样本处理与鉴定经验,可为客户提供高质量外泌体TEM检测服务,获得样本中外泌体典型形态特征图片。外泌体作为直径在30-150 nm的细胞外囊泡,***存在于血液、唾液、尿液等多种体液中。在生理和病理条件下南京实验医学平台一站式外泌体检测服务平台。福建外泌体测序
外泌体的产生过程,南京英瀚斯生物。新疆哪家做外泌体提取
外泌体中包含mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等多种RNA分子,不同类型细胞所分泌的外泌体包含的RNA分子不同,这些RNA分子以外泌体为载体进入靶细胞后,会通过不同的机制对靶细胞产生影响。通过高通量测序技术分析外泌体RNA分子差异,是对外泌体RNA功能研究的有效手段。英瀚斯生物在提取高纯度外泌体总RNA分子基础上,为外泌体研究提供专业高通量测序服务,采用全新文库构建技术,可获得mRNA、lncRNA、circRNA及miRNA等丰富信息,***提升外泌体研究深度及广度。新疆哪家做外泌体提取
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