液体固体试剂正确取用试剂的方法过程:液体试剂的取用方法试剂瓶取用试剂,用左手持量筒(或试管),并用大姆指指示所需体积刻度处。右手持试剂瓶(注意:试剂标签应向手心避免试剂沾污标签),慢慢将液体注入量筒到所指刻度。读取刻度时,视线应与液体凹面的低处保持水平倒完后,应将试剂瓶口在容器壁上靠一下,再将瓶子竖直医学|教育网搜集整理,以免试剂流至瓶的外壁。如果是平顶塞子,取出后应倒置桌上,如瓶塞顶不是扁平的,可用食指和中指(或中指和无名指)将瓶塞夹住(或放在洁净的表面皿上),切不可将它横置桌上。检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶。DMEM(High,without Sodium Pyruvate,含双抗)
试剂盒操作注意事项:使用前,先检查机器所有紧固件是否拧紧,皮带是否张紧。 主轴运转方向必须符合防护罩上所示箭头方向,否则将损坏机器,并可能造成人身伤害。 检查电器是否完整。检查机器粉碎室内有无金属等硬性杂物,否则会打坏,影响机器运转。物料在粉碎前一定要检查纯度,不允许有金属硬杂物混入,以免打坏引起燃烧等事故。机器上的油杯应经常注入润滑油,保证机器正常运转。停机前停止加料,如不继续使用,要清理机内物。定期检查同筛网是否损坏,如有损坏,应立即更换。 Earle's平衡盐溶液(1×EBSS,含钙镁糖)固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的。
氨苄青霉素是一种β-内酰胺类,干扰肽聚糖的交联从而克制细菌细胞壁的合成,属于氨基青霉素类。氨苄青霉素时常被用于分子生物学实验研究中,如用于配制含氨苄青霉素的LB培养基或LB平板等。氨苄青霉素溶液由氨苄青霉素溶于水组成,经0.22μm过滤除菌,可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为50~100μg/ml,其中严紧型质粒常采用20μg/ml,松弛型质粒常采用60μg/ml。使用方法:根据实验具体要求操作,一般Amp在LB中终浓度为50~100μg/ml。可以按照1/1000 LB体积加入100mg/ml Amp溶液,如100ml LB中加入100μl Amp 100mg/ml。注意事项:1、尽注意无菌操作,避免污染。2、避免反复冻融。3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
科研实验中试剂取用应注意事项:1. 取用少量的液体—使用胶头滴管a. 应在容器的正上方垂直滴入;胶头滴管不要接触容器壁【防止沾污试管或污染试剂】;b. 取液后的滴管,应保持橡胶胶帽在上,不要平放或倒置【防止液体倒流,沾污试剂或腐蚀橡胶胶帽】;c. 用过的试管要立即用清水冲洗干净;但滴瓶上的滴管不能用水冲洗,也不能交叉使用。2. 取用一定量的液体—使用量筒a. 当向量筒中倾倒液体接近所需刻度时,停止倾倒,余下部分用胶头滴管滴加药液至所需刻度线;b. 读数时量筒必须放平稳,视线与量筒内液体的凹液面的低处保持水平。检测试剂盒可在板孔中参加稀释液,再在其中参加血清标本。
BMC原代分离步骤:1) 抽取人的外周血于肝素抗凝管中,取足5mL新鲜血液,加入PBS按1:1稀释血液(一般**管2mL+2mL)。2) 取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。3) 吸取稀释血液,在离分层液上方1cm处,沿试管壁徐徐加入,使稀释血液重叠于分层液上,并与分离液形成明显界面。4) 室温,离心2000rpm,20min。此时离心管中形成5层:较上面是血浆,血浆层和淋巴细胞分离液之间是淋巴细胞层呈白膜状。5) 小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层,尽量全部吸出单个核细胞。加5倍以上体积的PBS洗2次,每次离心1500rpm,10min。检测试剂盒使液体充沛混合均匀,也使其得到充沛的反应。紫外法蛋白定量试剂盒
杀灭曲线的建立:根据细胞类型,设定合适的浓度梯度。DMEM(High,without Sodium Pyruvate,含双抗)
用pH计测定配制好的盐溶液的pH值,使其在6.4~7.0之间。一般盐雾标准中要求试验过程中的盐雾收集液pH值在6.5~7.2之间。当pH值不在上述范围时,应用氢氧化钠(NaOH)或者冰乙酸(CH3COOH)进行调节。氢氧化钠可以使pH值升高,冰乙酸使pH值降低。通常只需要加入少量的即可调节pH值。在氯化钠溶液中加入少量冰乙酸,搅拌均匀,并用pH计测量溶液的pH值,直至其为3.0-3.1之间,试验过程中收集液的PH值应在3.1-3.3之间。配制好乙酸盐雾溶液后,加入氯化铜,其浓度为0.26g/L±0.02g/L(即0.205g/L±0.015g/L无水氯化铜)。调节溶液的pH值,直至其为3.0-3.1之间,试验过程中收集液的PH值应在3.0-3.1之间。DMEM(High,without Sodium Pyruvate,含双抗)
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