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高通量测序基本参数
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怎样通过血球计数板进行质检操作呢?将血球计数板擦拭干净,取干净的盖玻片盖在计数板上;将细胞悬液混匀(或10µl台盼蓝+10µl细胞悬液),吸出10µl悬液至计数板上盖玻片的一侧使细胞核悬液铺满盖玻片和计数板之间;在显微镜下分别对V1/V2/V3/V4四个计数区域进行计数;按细胞计数公式进行计算,计算公式:细胞总数={(V1+V2+V3+V4)/4}*10000*悬液体积*稀释倍数,V1/V2/V3/V4为各个计数区的细胞数目,细胞活率=活细胞数目/总细胞数目*100%。寄送RNA样品请置于1.5 ml离心管中,管上注明样品名称、浓度以及制备时间,管口使用Parafilm封口。羟甲基化测序高通量测序NGS

生工人、大、小鼠全基因组测序,项目介绍:人或者大、小鼠全部基因组重测序,研究其突变信息(包括SNP/InDel/CNV/SV),并注释突变位点信息。该技术可同时获取编码区及非编码区突变信息,被广泛应用于遗传病、tumour及其它其它疾病研究中。测序平台:HiSeq XTen平台进行PE150测序。生工微生物基因组测序,项目介绍:微生物基因组重测序(有参)目前越来越多的微生物基因组被解析出来了。从而使得科研工作者们可以对某些物种微生物进行进行物种进化、种群特征、选择压力等研究。利用高通量测序技术,对有参考基因组微生物进行多个体的基因组重测序,精细分析其与参考基因组的SNP、InDel、SV等变异信息。上海市lncRNA高通量测序NGS如果问现在什么技术是测序届的宠儿,那么单细胞测序则是我们不得不提及的技术了。

small RNA测序,项目简介:Small RNA是一类重要的体内调节分子,长度在18-30 nt之间,主要包括miRNA、piRNA和siRNA。它的功能主要是诱导基因沉默,参与基因转录后调控,从而调节细胞生长、分化,以及个体发育、生殖等重要生物学过程。高通量测序技术可以对样本中所有small RNA家族进行测序和表达定量,从而解析miRNA、siRNA、piRNA和其它非编码RNA以及相应靶序列。测序使用Illumina Xten平台,测序原始数据质控后,进行Clean reads 长度分布统计,small RNA注释,已知 miRNA 注释,已知piRNA注释,ncRNA分析,新 miRNA 预测(有参考基因组),差异基因可视化分析,miRNA 家族分析,差异表达 miRNA 聚类分析,miRNA靶基因预测,靶基因GO、KEGG富集分析。

单细胞测序技术的应用:单细胞测序技术可以检测复杂组织中单个细胞不同的生物学特性,这可以极大的帮助我们进一步了解细胞与细胞之间的差异。"这几乎就像通过几颗星星看到了整个宇宙。"哈佛大学分子和细胞生物学教授 Alexander Schier的这句话应用在这里也是很合适了。这幅图正是来自于在2018年4月 Science 杂志发表的三篇[8-10]来自哈佛医学院和哈佛大学的研究人员关于单细胞基因测序文章中的一幅结果图,Alexander Schier教授也是其中一篇文章的作者。这几篇文章使用多种检测技术组合,其中包括对数千个发育中的斑马鱼和青蛙胚胎单细胞测序,在胚胎发育建议初的24小时内追踪单个细胞的发育情况,可以揭示出胚胎细胞何时何地转变为新的细胞状态和类型并向我们展示了组织和整个机体从单细胞发育的完整历程。请寄送样本(尤其是细胞样本)之前鉴定样本所属物种。

对于细胞样品,送样量需达到 5 × 106(5乘10的6次方)数量级。富集后置于 2 ml Ep管中,用 1 ml TRIzol 重悬,注意取样后立即用液氮或干冰乙醇速冻,保存于-80°C 冰箱,埋于足量的干冰中用保温箱寄送。强烈建议细胞样品先做细胞鉴定及支原体/衣原体污染之后,再送出来。对于血液样本,只接收未冻存过的抗凝血新鲜样本。抗凝剂不可使用肝素钠,可用EDTA或ACD抗凝剂,取血后以冰袋保存,切记不能使血液冻结,从取血之时开始计算,须在48小时之内送达生工上海总部高通量测序部。如果不能提供新鲜样本,则请提供从血液中提取的总RNA样本。备样要求详见B、RNA 样品。Illumina HiSeq2500/4000 可以运行PE150/PE250模式。上海地区基因组高通量测序项目

PacBio Sequel/RSII 该测序平台主要承接细菌基因组完成图测序、fungus基因组精细图测序、全长转录本测序服务。羟甲基化测序高通量测序NGS

2021年11月1日,在这个平凡而又特殊的日子里,生工生物高通量测序部迎来了一位新成员——10xGenomics Chromium X!不要看我们个头小,我们可是百万级单细胞捕获神器吆。X是如何实现单次运行有这么高的吞吐量呢?多通道+高捕获+10x的CellPlex多样本混样技术。X仪器本身有16个通道(Controller为8通道),每个通道比较多捕获20000个细胞(Controller为10000个细胞)。再结合10x的CellPlex多样本混样技术,每个通道比较多可捕获60,000个细胞,去除双细胞率后,每张芯片比较多可捕获750,000个单细胞。羟甲基化测序高通量测序NGS

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