CFDASE法(C0051、C1031)基于细胞荧光示踪的原理能检测到单个的增殖细胞，但由于每增殖一次荧光减弱一半，在荧光显微镜下较难区分荧光减弱一半的细胞，检测灵敏度不是很高，通常单适用于流式细胞仪检测。在进行科学研究时，上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名为5-乙炔基-2-脱氧尿苷，是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷，thymidine)类似物，EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢？山东哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU与T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性~山东哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒说明书上海东寰EdU细胞增殖检测试剂盒的运用领域。
EdU-488细胞增殖检测试剂盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为：试剂盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物，EdU可以在在细胞周期的S期中替代胸苷掺入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能与叠氮化物(如荧光探针AlexaFluor488Azide)通过Cu+的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)(图1)。通过点击反应，新合成的DNA会被绿色荧光标记，然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。
EdU细胞增殖检测和BrdU细胞增殖检测的对比。小分子化合物AndyFluor™azide与EdU之间的点击化学(ClickChemistry)反应不需要DNA变性，就可以进行高效快速的细胞增殖检测分析，该反应不受双链DNA中碱基对的影响，因此客户了BrdU掺入法的弊端。图2.使用EdU细胞增殖检测试剂盒对细胞和组织的染色效果。使用10μMEdU处理A549细胞2小时，然后分别使用AndyFluor™488azide(绿色,上图)、AndyFluor™594azide(红色,中间图)检测细胞增殖活性，使用DAPI进行复染（蓝色）。腹腔注射EdU到小鼠体内（每公斤小鼠注射5mgEdU），分别于0、12、24小时之后取小鼠肠组织，制成切片用AndyFluor™488azide(绿色,下图)检测细胞的增殖情况，使用DAPI进行复染（蓝色）。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒如何去使用呢？
EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性（酸解、热解、酶解）处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调：“与传统的免疫荧光染色不同，EdU反应能在几分钟内完成，且不需要进行严格的样品变性处理，使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo？荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA，简单，快速，准确。这种检测方法非常快速，且只需简单的几个步骤，因此也适用于高通量筛选试验，如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。EdU细胞增殖检测试剂盒给社会带来了什么好处？江苏如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
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按照以下的表格进行染色反应液的配制：染色反应液组分500μl1ml2ml5ml1×反应缓冲液430μl860μlmlml催化剂溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA红色荧光溶液μlμl5μlμl缓冲添加剂50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的检测混合液，以覆盖细胞为宜，避光、室温孵育30分钟；4、弃染色反应液，加入100μlTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次，每次10分钟；5、弃细胞渗透液，用PBS洗两次，每次5分钟。DNA染色1、将Hoechst33342用RNase-free水溶液1：1000进行稀释得到终浓度为5μg/ml的1×Hoechst染色液；2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液，室温避光孵育20-30分钟后，弃染色液；3、每孔加入100μlPBS洗细胞两次，去掉洗液。图像获取及分析建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察；如果条件限制，请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片，可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。山东哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
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