徐州呼吸疾病动物模型建模

具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对发明作进一步阐述。本发明构建了pirb基因敲入的小鼠动物模型，将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内。具体来说，构建一个cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，将其克隆进入rosa26基因的内含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七号染色体。本发明pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法，具体按照以下步骤具体实施:步骤1、根据小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher软件在1号内含子设计grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因组数据库基因，采用crispr脱靶效应软件cas-offinder检测潜在的脱靶位点：**终选取两个grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg将grna1和grna2分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构；步骤2、利用c57bl/6小鼠文库bac克隆，通过pcr扩增获得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法构建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的质粒打靶载体，通过酶切、pcr及测序对打靶质粒载体进行验证，图1为构建好的pirb基因打靶载体的示意图。可以简化实验操作和样品收集。徐州呼吸疾病动物模型建模

建立一种理想的腰椎间盘突出的动物模型对本病的机制研究和临床防治具有重要意义。现有模型对腰椎间盘突出症的模拟均存在明显不足，或与临床实际病变部位有一定差距，如慢性坐骨神经结扎模型；或操作难度大，对动物损伤重，如自体髓核移植模型，选择性神经根结扎模型。因此，急需一种新的操作简单，重复率高，稳定且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型。技术实现要素：为了建立一种操作简单，稳定好且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型，本发明提供了一种大鼠慢性背根神经压迫模型的制备方法。其包括以下步骤：步骤一、麻醉大鼠；步骤二、于大鼠腰4到骶1水平左侧或右侧作纵行切口，切开皮肤，钝性分离椎旁肌，暴露腰4椎间孔和腰5椎间孔；步骤三、将压迫元件插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中，得到大鼠慢性背根神经压迫模型。其中，步骤一具体为：腹腔注射1％戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠后，将大鼠背部剃毛，碘伏消毒背部皮肤，俯卧位固定于动物手术台上，铺无菌巾。在一个具体实施方式中，压迫元件为l型棒；步骤三具体为：将2根l型棒的***端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中，l型棒的第二端置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。江苏C57小鼠疾病动物模型建模人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。

引起组织坏死，从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素：针对上述现有技术，本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡，引起组织坏死，从而导致卵巢功能早衰”这一原理，使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型，并对比各种方法间的优劣性，筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间，为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单，成功率高，结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的：一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法：将剂量为按体重一日2～3mg/kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：连续施用7天，末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。或：将剂量为按体重4～6mg/kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：第1天、第8天施用；末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。进一步地，可将顺铂溶于％氯化钠溶液配置成顺铂注射液，然后注射。所述顺铂，可市场常规购买得到，比如齐鲁制药公司生产的顺铂。进一步地，注射期间每天称量大鼠体重，注射后每周称量2次；末次注射后15天，麻醉取血检测***水平，取卵巢检测对比卵巢重量。

    可用锇酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或细胞涂片以及某些薄膜组织的固定。（2）固定的目的①保持其原有状态：使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，迅速防止组织、细胞的死后变化，防止自溶与，防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态结构，使之尽量保持生前的状态和结构。②以便染色后易于鉴别和观察：不同组织成分对染料有不同的亲和力，以便染色后易于鉴别和观察。③使组织块硬化，便于制作薄片（组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程中不易损坏）。（3）固定液固定液种类：一类是单纯固定液，即只有一种试剂；另一类是混合固定液，由两种或两种以上试剂组成。作为较好的固定液，应有下列特性，首先，有强渗透力，能迅速的渗入组织内部；其次，不使组织过度收缩或膨胀，并能使组织内欲观察的成分得以凝固为不溶性物质；，能使组织达到一定的硬度并获得较佳的折光率和对某些染料具有较强的亲和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的组织，常需要特殊的固定液，取样之前应做好准备。如眼球样本应使用FAS眼球固定液，脂肪组织应使用脂肪组织固定液等。此外，在进行骨组织样本制备的时候，还应注意提前进行脱钙处理。哪里可以做动物模型？

    然后再入固定液，但要注意防止组织损伤。要熟悉采集部位。要能准确的按解剖部位采集，如胰腺，一般取胰岛较多的胰腺尾部；肺应取有细支气管及带有软骨片的小支气管部。如果实验需进行多组织样本的采集，采集顺序应按照：消化，神经系统，皮肤，肌肉等的顺序进行。选好组织块的切面。熟悉某些组织成分安排，然后决定其切面的走向；如一长管状以横切面较好。切除不需要的部分。特别是组织周围的脂肪等，应尽可能掉，否则给固定、脱水、浸蜡、切片等带来一些不必要的问题。组织样品的固定（1）固定的方法：①小块组织固定法：从动物取下的小块组织，立即置入液态固定剂（这是应用经常的方法）。②注射/灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部或需要对整个脏器或整个动物进行固定，这时宜采用注射固定法，将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。另，空腔组织比如肺，肺内含有空气，固定液难以渗入，建议先做肺灌注，使得肺充盈满固定液以后再进行保存，如果空腔中气体没有有效排出，后续可能影响固定效果（没有灌注的肺组织会浮在液体表面不利于固定，切片以后也会看到很多的空泡）。③蒸汽固定法：比较细小而薄的标本。构建人源移植瘤模型需要合适的免疫缺陷小鼠想知道如何选择？阿尔兹海默症疾病动物模型建模购买

避免了在人身上进行实验所带来的风险。徐州呼吸疾病动物模型建模

动物模型名称：高脂饲料致高脂血症大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：180~220g1、实验方法：大鼠给予高脂饲料喂养20天。分别于造模前和造模20天，测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、检测标准：造模20天后模型组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均增加，与对照组比较具统计学差异。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料.徐州呼吸疾病动物模型建模