一提起蛋白质浓缩、更换缓冲液,我们都会想起超滤。这是一种我们都很熟悉的膜分离技术。它可用来分离溶液中极小的颗粒和溶解的分子。这种方法的较大特点是操作简便,只需要浓缩离心管和离心机,即可圆满完成我们的任务。与层析、透析等方法相比,超滤对被处理的分子更加温和。它不需要有机萃取,就不会导致蛋白变性。这种方法非常高效,可同时浓缩和纯化分子。操作可在低温(比如冷库)下进行。另外,快速、便宜,也是许多人青睐它的原因。浓缩离心管的操作很简单。选择适当的浓缩离心管,加入待处理的样本,按照离心管的指示进行离心操作,之后回收截留的样本。在离心力的作用下,溶液中的小分子溶质和溶剂透过超滤膜,被收集在滤过液收集瓶中,而大分子溶质被超滤膜截留在浓缩离心管中。这种分离的主要依据是分子大小,但分子形状和电荷等其他因素也会有影响。超滤离心管通常具有标准化设计,使其易于与其他实验室设备集成使用。成都超滤离心管采购
超滤离心管的常见问题与解答,一:超滤离心管的膜材质是什么?超滤离心管的膜材质为特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而,蛋白吸附损失较小。二:如果要用超滤离心管的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。不保证超滤离心管不包含RNA酶,建议用0.1%DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q超纯水洗涤除去。去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration、CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果,具体的操作步骤请垂询我们。浙江30K超滤离心管订做超滤离心管还可以用于检测样品中的元素、抗体等生物活性分子。
蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积,还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如,当靶蛋白的分子量为35kDa时,可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd,则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上,冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后,可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。
选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。超滤离心管可以去除混合物中的杂质和低分子量化合物,得到高纯度的目标化合物。
回收浓缩液主要有两种方法:一种是用吸管直接吸取并回收,另外一种是将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存,因此超滤管常配合离心机使用。超滤管主要应用有以下几个方面:1.浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株DNA/RNA样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物标本。2.净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合页中去除引物、链接或分子标记,在HPLC之前去除蛋白质,3.除盐、更换缓冲液或渗滤。根据其材质的不同总体可以分为塑料和玻璃的,塑料的离心管用的较多,又可以分为PP、PC、PS等,根据不同需要,生产厂家会选择不同的塑料材料来进行制作。使用超滤离心管时应注意避免与酸、碱等化学物质接触,以免损坏其结构和性能。广东小型超滤离心管生产公司
使用超滤离心管时应注意保持其清洁和卫生,并定期更换超滤膜以确保较佳效果。成都超滤离心管采购
玻璃离心管玻璃离心管是由玻璃制成的,不同厂家可能使用的玻璃成分不同,所以强度上可能会略有差异。我们的普通玻璃试管可以承受的相对离心力(RCF) 通常小于3000g ,而硼硅玻璃管一般可以承受超过10000g 以上的相对离心力。但由于玻璃离心管质量易碎,所以玻璃管一般不用于高速离心机,用得也不多。由于玻璃本身的特性,它具有良好的化学稳定性,能与酸、碱和有机溶剂和平共存。玻璃管外形稳定,能承受一定程度的挤压,但不能抵抗碰撞,在 高速离心时容易破碎,虽然能抵抗高温,能抵抗热冲击,但在温度突然剧烈变化的环境中也很容易断裂。成都超滤离心管采购