培养基灭菌方法有哪五种类型:1、辐射灭菌原理方法:辐射灭菌原理:是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线,X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法:干热灭菌原理:是采用高温氧化微生物,使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法,化药灭菌原理:使用化药与微生物细胞中的成分发生反应,从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法:过滤灭菌原理:是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气,酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法:在工业生产中,用于灭菌对于培养基,管道和设备,通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间,这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理:是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力,破坏细菌蛋白质和核酸的化学键,使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。中国台湾Systec培养基制备仪
固体斜面培养基配制:培养基的过滤澄清,液体培养基必须一定澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55~60°C的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1~2个鸡蛋的蛋白,强力振摇3~5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121°C加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。培养基的分装,培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。中国台湾Systec培养基制备仪高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低,应在配制培养基时加以调节。
配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。
培养基的分类:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。
干粉培养基有哪些注意事项:①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行,如果使用铜或铁器皿,会影响细菌的生长。②注意按照先加水再加颗粒干粉培养基顺序,反之则不利于培养基溶解。③单在必要时进行加热溶解操作,其加热温度也不要过高时间不要过长,主要原因是高温会破坏琼脂和培养基中的一些营养成分。④生产的干粉培养基和颗粒培养基都经过pH校准,使用时无需特殊验证。因为高压会影响pH值,则应在高压后验证pH值。⑤液体培养基通常是预先包装好的,分装时应注意每管的用量不得高于试管的三分之二。⑥高压后冷却至五六十度环境,再导入平板,否则会形成更多的水蒸气,导致细菌分离数量。脱水培养基,又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。培养基制备仪厂家
按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。中国台湾Systec培养基制备仪
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