培养基灭菌方法有哪五种类型:1、辐射灭菌原理方法:辐射灭菌原理:是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线,X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法:干热灭菌原理:是采用高温氧化微生物,使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法,化药灭菌原理:使用化药与微生物细胞中的成分发生反应,从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法:过滤灭菌原理:是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气,酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法:在工业生产中,用于灭菌对于培养基,管道和设备,通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间,这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理:是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力,破坏细菌蛋白质和核酸的化学键,使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。江西实验室培养基制备仪
配制好的培养基保存:灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度,避免长时间保存在灭菌锅内,造成过度灭菌,影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量,应该是在较长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完,应于冷藏保存,如果保存时间超过2天,应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期,应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。江西实验室培养基制备仪培养基长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。
含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题:在此种情况下,建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底,造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程,因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂;不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,颜色越深;研磨时间越长,颜色越深等三个原因。
培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的较长保存2年,开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并在6个月内用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、一次开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节,培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。液体培养基在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。
培养基的配置应该注意的几大步骤:常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。一般培养基用0.IMPa(121℃)维持15~30min即可彻底灭菌。黑龙江培养基制备仪价格
有的培养基还含有素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。江西实验室培养基制备仪
干粉培养基有哪些注意事项:①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行,如果使用铜或铁器皿,会影响细菌的生长。②注意按照先加水再加颗粒干粉培养基顺序,反之则不利于培养基溶解。③单在必要时进行加热溶解操作,其加热温度也不要过高时间不要过长,主要原因是高温会破坏琼脂和培养基中的一些营养成分。④生产的干粉培养基和颗粒培养基都经过pH校准,使用时无需特殊验证。因为高压会影响pH值,则应在高压后验证pH值。⑤液体培养基通常是预先包装好的,分装时应注意每管的用量不得高于试管的三分之二。⑥高压后冷却至五六十度环境,再导入平板,否则会形成更多的水蒸气,导致细菌分离数量。江西实验室培养基制备仪
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