购买的重组蛋白单位一般是 μg，重组蛋白检测结果和用量常用单位是 U/mL 或 IU/mL。U是什么？和IU之间有什么差别？它们又是怎么与 μg 进行换算的呢？首先，U 是蛋白活性单位，用于计量蛋白本身的生物学活性。活性单位指在适条件下，单位时间内产生单位生物学效应的蛋白量。以酶为例，1961年，国际生物化学学会酶学委员会提出采用统一的「国际单位」（IU）来表示酶的活力，在合适条件下，每分钟内催化 1 微摩尔（μmol）底物转化为产物或转化底物中 1 微摩尔的有关基团所需的酶量。即 1 IU＝1 U＝1 μmol/min。IU 与 μg之间的换算，要引入比活性的概念。比活性是指单位质量蛋白的生物学活性单位，通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。以酶为例，在合适条件下，如果 1 μg 酶可以在 1 分钟内催化 1μmol 的底物，那么其比活性就是 1U/μg。比活性是重组蛋白的一项重要指标。进行比活性项目的检测，不仅可以反映产品生产工艺的稳定情况，而且可以比较不同表达体系、不同生产厂家生产同一产品的品质情况。比活性高说明产品的生产工艺更先进、纯度更高、质量更优。重组蛋白的应用显著增长，用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品也得以增长。PeproTechLIF重组蛋白怎么样
昆虫细胞是多种重组蛋白的多功能表达宿主。其较强的折叠能力和较高的培养密度使其成为表达细胞内复杂蛋白和病毒蛋白的理想选择。2007年，由昆虫细胞系以病毒样颗粒(VLPs)的形式生产的病毒疫苗Cervarix被批准用于人类。除了在疫苗开发方面的潜力外，昆虫细胞产生的高活性蛋白还应用于生物物理学和生物化学的各个学科，如结构解释、药物设计、测定方法建立和诊断试剂开发等等。许多生物厂家利用昆虫细胞进行重组蛋白产品开发和承包研究项目。PeproTechLIF重组蛋白怎么样不同表达系统所生成的重组蛋白间有何主要区别？
由于重组蛋白通常在不同的表达系统中生产，容易受到各种因素的影响进而引起蛋白质的性质出现差异，因此为了保证获得高质量，稳定的结果，在药物分析、新药研发、细胞 therapy等应用中优先选择GMP（Good Manufacturing Practice, 良好生产规范）级重组蛋白。GMP要求企业从原料、人员、设施设备、生产过程、包装运输和质量控制等方面达到法规相关要求，形成一套可操作的作业规范。GMP级重组蛋白具有以下几个优点：详实的产品信息；严格的质量管理体系；批次间稳定性高；无外源动物源性。
不同表达系统所生成的重组蛋白间有何主要区别？以赛默飞为例，Thermo Fisher Scientific™ 所提供的重组蛋白产品通常在大肠杆菌，昆虫细胞或哺乳动物细胞等不同的表达系统中产生。不同表达系统之间产生的重组蛋白的主要差别在于这些蛋白所携带的翻译后修饰，如糖基化修饰。在大肠杆菌中生成的重组蛋白未经糖基化。在昆虫细胞中产生的重组蛋白通常经有部分糖基化，但不含半乳糖和唾液脱盐酸，糖链也无复杂分支。在哺乳动物细胞中生成的重组蛋白会发生附带完全的糖基化修饰。备注：Mimic™ Sf9 昆虫细胞（来源于sf9昆虫细胞系，经改造可稳定表达多种哺乳动物糖基转移酶）可产生用于表达带末端唾液酸和半乳糖的复杂的N-糖链。外企的重组蛋白药物占据了全球将近60%的医药市场份额。
如果说明书上没有具体的说明，如何重溶（Reconstitute）冻干的重组蛋白？我们建议采用以下方式：（1）将试剂瓶和重溶缓冲液平衡至室温。（2）短暂离心试剂瓶以确保在小瓶底部收集所有冻干物。（3）加入推荐的重溶缓冲液，达到产品说明上推荐的浓度。避免剧烈振荡或移液器吹打，这可能导致蛋白质变性。（4）使试剂瓶在室温下重溶15-30分钟，可使用360度摇床或手动轻轻上下颠倒。（5）每管体积不小于10μL分装，并按产品说明书上的指示储存。（6）如果小瓶内呈现薄片或颗粒，则在室温下将产品混合几小时，然后在4℃过夜。选择合适的重组蛋白表达系统，至关重要。PeproTechLIF重组蛋白怎么样
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对于临床使用的 GMP 级蛋白，批次间一致性是重要的指标之一。其次，要符合 GMP 要求的质量管理体系，至少，所选供应商应通过 ISO 9001: 2008/2015 相关认证的质量管理体系（QMS），质量管理体系是经过认证的符合相关政策的大量的文件和记录管理系统以及生产过程的可追溯性。而后，要挑选无动物源性的重组蛋白，相较于普通实验条件生产的重组蛋白，Animal-free 重组蛋白具有如下突出的优势：不会引入疯牛病病毒或者其它未知病原体；不会引起异种免疫排斥和过敏反应；不会因微量动物活性成分引发副作用。PeproTechLIF重组蛋白怎么样
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