液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。培养基的配制:配料:配方换算→在容器中加入少量水→按照配方称取各种药品,依次加入→加足所需水量一药一勺,取药后立即盖上瓶盖。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。强力磁力搅拌培养基在内腔里混合的均匀性得到确保,并避免凝结。北京培养基制备器供应商
培养基配制:素:为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均被为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。北京培养基制备器供应商全自动培养基制备分装系统:全自动程序,无人值守;分装过程无需人工干预。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:简单制作培养基,必须将其过滤并澄清液体介质必须完全澄清,普通液体介质可用滤纸过滤,滤纸应折成折扇状或漏斗状,以免滤纸因水力不均而破裂。当温度较高时,培养基可以用干净的白天鹅绒过滤。新制肉、肝、血、马铃薯等滤液,必须用丝绒布过滤,再用滤纸一次又一次地过滤。若过滤方法不能满足澄清的要求,则应采用蛋清过滤。需要对介质分类处理,按培养基及试管内其它烧瓶使用的容器、用途分为适当。货运量超过每2个集装箱3个容量包装的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮纸塞纸封堵容器内棉。电动式装配机采用定量很好的重用或半自动解。预处理和预处理对灭菌容器的清洗要干燥,灭菌时要彻底,培养基要干燥。一只小玻璃瓶批培养基被检测出,培养基被一批 pH批作为该值基准时,应被分成20 mL的培养基进行消毒处理。
配制培养基的原则:灭菌处理:为了避免杂菌污染,获得微生物纯培养物,培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0. IMPa (121℃)维持15 ~ 30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培养基常用0.05MPa (110℃) 灭菌20 ~ 30min某些对糖类要求更高的培养基,可先将糖过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生,可将这些物质分别灭菌,冷却后再混合;也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物,防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基 pH降低, 应在配制培养基时加以调节。培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。
天然培养基中血清主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质(氢化可的松、)、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要。北京培养基制备器供应商
液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。北京培养基制备器供应商
利用三角培养瓶制备培养基:包扎,分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌,按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面,灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。贮存,培养基在30℃下放置,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养基是细胞生长的必需营养物质,利用三角培养瓶制备培养基可按照以上步骤操作,在使用前需确保培养基的无菌性,以免影响细胞正常繁殖。北京培养基制备器供应商