方法 |
灵敏度 |
优势 |
劣势 |
培养法 |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准 |
ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基 |
DNA染色 (DAPI or Hoescht) |
☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性 |
间接染色 |
☆☆☆ |
ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测 |
ü 费时 ü 需要细胞系指示 |
ELISA |
☆☆ |
ü 迅速 ü 客观,易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属 |
ü 受抗体限制 ü 价格高 |
免疫染色 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高 |
ü 可检测的支原体种属有限 |
放射自显影 |
☆☆ |
ü 迅速 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力 |
生物发光 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 |
PCR |
☆☆☆ |
ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
Real-Time PCR |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
LAMP |
☆☆ |
ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 对于同一个样品,为什么一步法恒温试剂盒检测结果为阳性,而PCR检测为阴性呢? |
支原体预防的实验步骤?温州细胞支原体去除货期
将洗涤后的细胞悬浮在适量的PBS中,取一部分细胞悬液放入无菌离心管中。在取样过程中,要保持操作的轻柔与稳定。避免产生过多的气泡或剧烈晃动,防止对细胞造成机械损伤或引入不必要的污染。同时,为了提高检测结果的准确性,可以进行多次取样。例如,从不同的培养瓶或培养板中分别取样,或者在同一培养容器的不同位置进行取样。取样完成后,要尽快将样本送往检测实验室。在运输过程中,要确保样本的稳定性和安全性。可以使用冷藏或保温设备,根据检测要求保持合适的温度条件。总之,细胞支原体检测的取样环节需要严格遵循无菌操作原则,精心准备、准确操作。只有这样,才能获取具有代表性的样本,为准确检测支原体污染提供可靠的依据。支原体...