荧光定量 PCR 仪是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对 PCR 产物进行标记跟踪，实时监测反应过程的仪器。仪器特点：高灵敏度和特异性：能检测极低拷贝数的核酸模板，对目标序列具有高度特异性，可减少假阳性和假阴性结果。准确 quantification：通过实时监测荧光信号，实现对核酸模板的准确定量，结果准确可靠。高 throughput：可同时检测多个样品，大幅提高检测效率，节省时间和成本。高度自动化：具备自动进样、反应程序设置、数据采集和分析等功能，操作简便，减少人为误差。核酸完整性：完整的核酸才能保证 PCR 反应正常进行。徐州荧光定量PCR仪
ROX通常并不指代一种特定的荧光定量PCR仪，而是一种荧光染料，在荧光定量PCR中常被用作被动参考染料。其作用是用于校正荧光信号，减少孔与孔之间由于加样误差、反应体积差异、光学系统的微小变化以及蒸发等因素导致的荧光信号波动，提高实验的准确性和重复性。在实时荧光定量PCR仪的使用中，很多仪器都可以兼容ROX染料进行信号校正。例如，赛默飞世尔的QuantStudio系列、ABI的7500、7900等型号的荧光定量PCR仪都支持ROX染料。不同的荧光定量PCR仪在检测通道、光学系统、热循环性能等方面存在差异，但只要其具备相应的荧光检测通道，能够检测ROX染料的荧光信号，并在软件中支持以ROX信号作为参考进行数据校正，就可以在实验中使用ROX染料来辅助提高定量分析的准确性。例如，QuantStudio1实时荧光定量PCR仪采用新型Optiflex光学检测架构，提供FAM、VIC和ROX三种常用激发和发射滤光片，实现3重实时定量分析。苏州Cy5.5荧光定量PCR仪价格受到仪器的整体性能、光学系统设计、荧光染料质量以及数据处理算法等多种因素的综合影响。
SYBR Green I是一种双链 DNA 结合染料，它能非特异性地嵌入双链 DNA 的小沟中。在游离状态下，SYBR Green I 发出微弱的荧光，但当它与双链 DNA 结合后，荧光信号会明显增强。在荧光定量 PCR 反应中，随着 PCR 产物的不断合成，SYBR Green I 与双链 DNA 结合，荧光信号强度不断增加，通过检测荧光强度的变化来反映 PCR 产物的量，从而实现对起始模板的定量分析。特点：能与所有双链 DNA 结合，不依赖于特定的序列，因此可用于各种 DNA 模板的定量分析，通用性强。其激发波长约为 497nm，发射波长约为 520nm，荧光颜色为绿色。但由于它非特异性结合双链 DNA，可能会对引物二聚体等非特异性产物也产生荧光信号，需要通过熔解曲线分析等方法来区分特异性产物和非特异性产物。
荧光定量 PCR 仪应用领域：基础科研基因表达分析：研究特定基因在不同组织、细胞以及不同生理状态或处理条件下的表达水平，有助于深入理解基因的功能和调控机制。基因功能研究：通过定量分析基因表达的变化，探讨基因在细胞增殖、分化、凋亡等过程中的作用，以及基因之间的相互调控关系。农业研究：作物遗传改良：检测植物基因组中的突变和表达量变化，评估作物的生长发育情况和适应性，为作物品种选育和遗传改良提供依据。植物病虫害检测：快速检测植物病原体，如病毒、细菌、等，有助于及时采取防治措施，保障农作物产量和质量。在一些荧光定量 PCR 仪的相关介绍中会提及对 TET 染料的支持。
ROX原理：主要用于荧光定量 PCR 中的校正和归一化。在反应体系中，ROX 的荧光强度相对稳定，不受 PCR 反应过程的影响。通过检测 ROX 的荧光信号，可以对其他荧光染料的信号进行校正，消除由于加样误差、反应体积差异、仪器波动等因素引起的荧光信号变化，提高定量结果的准确性和可靠性。特点：激发波长约为 570nm，发射波长约为 590nm，荧光颜色为红色。ROX 通常与其他荧光染料如 FAM、VIC 等配合使用，在多重荧光定量 PCR 中，为每个反应孔提供一个稳定的内参荧光信号，以便对不同孔之间的荧光信号进行标准化处理。准确的热循环系统对于保证 PCR 反应的特异性和效率至关重要，进而影响检测灵敏度。南京 ROX荧光定量PCR仪价格
并且，TET 染料具有较高的荧光量子产率，即在受到激发后能够高效地发出荧光。徐州荧光定量PCR仪
荧光定量 PCR 仪的检测结果会受到多种因素的影响，包括仪器设备、试剂质量、样本处理以及实验操作等方面，以下是具体介绍：样本处理因素样本采集：样本采集的部位、时间和方法不当都可能影响检测结果。例如，采集的样本量不足、未采集到病变部位的细胞，或者样本被污染，都可能导致检测到的目标核酸含量不准确，出现假阴性或假阳性结果。核酸提取：核酸提取的质量和效率直接关系到后续检测。提取过程中若核酸被降解，会使模板量减少，导致定量结果偏低。此外，提取的核酸中若含有蛋白质、多糖等杂质，也会抑制 PCR 反应，影响扩增效果和检测结果的准确性。徐州荧光定量PCR仪
