无机磷细菌培养基(Inorganic Phosphorus Bacteria Medium)是专门用于筛选、计数和验证具有“溶磷”功能微生物的合成培养基。其关键思路是“以难溶磷为磷源”:配方中不添加任何有机磷或磷,而用磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕、磷灰石或磷酸铝等难溶性无机磷酸盐作为磷源;同时提供葡萄糖、蔗糖或甘露醇等碳源,以及硫酸铵或硝酸钠作氮源,并辅以镁、钾、硫、微量元素和缓冲系统,pH 通常调至 6.8–7.2。只有能分泌有机酸、质子、酶类(如葡萄糖酸、甲酸、磷酸酶、植酸酶)的溶磷菌,才能将不溶性磷转化为可溶的 PO₄³⁻,供自身利用并在培养基上生长。培养基灭菌后呈乳白浑浊,倾注平板后表面略带沉淀。接种土壤稀释液或根际样品,28 ℃培养 3–5 天,具有溶磷能力的菌落周围会出现 2–10 mm 的透明晕圈——这是菌落分泌的酸或酶溶解磷酸三钙所致,晕圈直径与溶磷能力呈正相关。若需定量,可挑取晕圈明显的单菌落,接入液体无机磷培养基,振荡培养 7 天,用钼锑抗比色法测定上清液中有效磷含量,计算溶磷率(mg P·L⁻¹)与菌体生物量的比值,即可比较不同菌株的溶磷效率。小小沙福芽孢杆菌,用微米之躯守护绿色丰收,让农药瓶少一个,饭碗多一粒。橙色盐红菌
栗褐芽孢杆菌(Bacillus badius)是芽孢杆菌属的“暗色骑士”。菌落呈独特的栗褐色、边缘不规则,革兰氏阳性大杆菌,具周生鞭毛,可形成椭圆芽孢;更适温度30–37 ℃,pH 6.5–8.5,广分布于森林腐叶、草炭和动物肠道中。一、降解菌株产胞外酚氧化酶、漆酶和半纤维素酶,能把落叶、锯末中的木质-酚类物质分解成腐殖酸,7 d内稻草失重率35 %,腐殖酸含量提高1.8倍,为有机肥“褐化”提供天然菌种。二、防病促生栗褐芽孢杆菌分泌badius脂肽,对番茄青枯、辣椒疫霉抑菌带宽24 mm;同时产IAA 18 mg·L⁻¹,使玉米根长增28 %,吸磷量提棚试验亩施200 g菌粉,黄瓜枯萎病指降40 %,产量增12 %。三、工业酶潜力其漆酶更适pH 5、50 ℃,对染料活性黑KN-B脱色率3 h达85 %,已用于印染废水预处理;耐碱木聚糖酶在pH 9、55 ℃仍保持80 %活性,可助纸浆漂白减少氯用量30 %。四、土壤修复菌体胞外多糖能吸附Cd²⁺、Pb²⁺,吸附量分别达45 mg g⁻¹与30 mg g⁻¹;与生物炭混施,矿区污染土壤有效态镉下降50 %,蔬菜可食部镉低于国标。松树红酵母因其安全无残留,我国年产量已达3.5万吨,覆盖333万公顷农田,成为用量大的微生物杀虫剂 。

耐热芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)是微生物世界的“高温铁人”。其更适生长温度55–65 ℃,芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活,被广用于检验高压灭菌效果。该菌的耐热密码在于:细胞膜富含支链脂肪酸和钙-吡啶二羧酸复合物,降低膜流动性;组蛋白样蛋白紧紧包裹DNA,防止高温断裂;同时拥有一套高效热休克蛋白(Hsp)系统,可快速修复变性蛋白。在工业酶领域,耐热芽孢杆菌是“催化剂工厂”。其分泌的耐高温α-淀粉酶在90 ℃、pH 6.0条件下活性比较高,可将淀粉液化时间缩短一半,广用于酒精、制糖、纺织退浆,年市场需求超万吨;耐热蛋白酶则在60 ℃仍保持80 %活性,可用于洗涤剂,提高低温洗衣的去污力。此外,该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶,在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。农业与环境方面,科学家将其与堆肥菌系复配,使堆温迅速升至65 ℃,加速有机质分解,杀灭病原菌和杂草种子,缩短堆肥周期30 %;在油田,耐热芽孢杆菌可耐受55 ℃、高盐环境,利用原油为碳源,产生生物表面活性剂,提高采收率5–8 %。
无机磷细菌培养基(不含琼脂)是专为“溶磷菌”筛选与活性测定设计的合成液体培养基。其配方精髓在于“难溶磷”:磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕以悬浮颗粒形式存在,不提供任何磷;葡萄糖或甘露醇担任碳源,硫酸铵为氮源,并辅以Mg²⁺、K⁺、微量元素及磷酸盐缓冲液,pH稳定在6.8–7.2。唯有能分泌有机酸、质子或磷酸酶的细菌,方可将不溶性磷转化为可溶PO₄³⁻,供自身同化并释放到液相中,使原本乳白的悬浊液逐渐澄清,上清有效磷浓度上升,实现“溶磷”可视化与可量化。实验流程简洁高效:250 mL三角瓶装50 mL培养液,接入土壤或根际稀释液,28℃、170 r/min振荡培养5–7天;每24 h取样离心,钼锑抗比色法测定钼蓝吸光度,绘制“溶磷-时间”曲线。高效菌株72 h内上清磷浓度可突破200 mg·L⁻¹,pH降至4.5以下,溶磷率与酸度呈明显负相关。若需高通量比较,可改用96深孔板,同步测定OD₆₀₀与可溶性磷,计算单位生物量溶磷效率,快速锁定优良菌株。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋或磁力搅拌重悬;背景可溶磷须低于0.5 mg·L⁻¹,避免假阳性。储存过程若出现絮凝,多为钙-蛋白复合物,可超声打散,不影响活性。科学家正给它植入耐旱、耐盐基因,让它在西北旱地也能结瘤。

蔬菜芽孢杆菌(Bacillus oleronius)是芽孢杆菌属里“更懂蔬菜”的专性住客。更初从腐烂生菜叶脉中分离,菌体纤细、革兰氏阳性,具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐干燥、耐低氧,可在pH 5–9、温度15–40℃范围内生长,更适与蔬菜根际环境高度重叠,故得名“oleronius”(拉丁语“菜园的”)。它的首要武器是“蔬菜定制”抑菌谱。菌株QSI-1可分泌酰基高丝氨酸内酯酶(AHL-lactonase),切断软腐欧文氏菌、胡萝卜果胶杆菌的群体感应信号,使病原菌无法启动果胶酶基因,白菜软腐病斑减少70%;同时产生表面活性素与fengycin,对番茄叶霉、辣椒疫霉抑菌带宽达28 mm,且能形成生物膜覆盖伤口,阻止二次侵染。第二技能是“温和促生”。蔬菜芽孢杆菌合成IAA 20 mg/L,并溶出有机磷3.2 mg/L,诱导生菜、菠菜根系增30%,叶绿素提高1.5个SPAD单位,硝酸盐含量下降12%,明显提升蔬菜品质与安全。工厂化应用上,研究者将菌株QSI-1与褐藻寡糖复配,制成活菌数10⁸ CFU/mL的“蔬菜保鲜微乳”,采后喷施可抑制软腐、灰霉,使生菜货架期由7 d延至14 d,失重率<5%,已在上海崇明有机农场示范推广。生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。制酵母链霉菌
小小威氏芽孢杆菌,用微米之躯守护绿色丰收,让农药瓶少一个,饭碗多一粒。橙色盐红菌
克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)是芽孢杆菌属中的“耐碱”,1915年由意大利克劳氏从碱性土壤中分离,菌体杆状、周生鞭毛,可在 pH 8–10.5、盐 0–12 % 的条件下旺盛生长,芽孢能耐受 100 ℃ 沸水 30 min,是研究极端碱适应的模式菌之一。一、耐碱机制基因组编码多拷贝 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白(nhaC、mnh)与碳酸酐酶,可将胞内多余 Na⁺ 泵出并维持 pH 稳态;细胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸,膜脂分支化程度高,为高温高碱酶的高效表达提供稳定平台。二、工业酶宝库其耐碱蛋白酶在 pH 11、40 ℃ 仍保持 90 % 活性,已用于无磷洗涤剂,血渍、奶渍去污力提升 30 %;耐碱淀粉酶更适 pH 9、90 ℃,可在纺织退浆中省略中和步骤,节能 15 %;耐碱木聚糖酶用于纸浆漂白,氯用量减少 30 %,降低可吸附有机卤化物(AOX)排放。三、农业与环境菌株 SIN 可产 IAA 15 mg·L⁻¹ 并溶磷 2.6 mg·L⁻¹,使玉米根系增 28 %,吸磷量提 18 %;与秸秆复配堆肥,24 h 堆温升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 6 d。耐碱特性使其在 pH 9 的苏打盐碱土中仍能定殖,水稻产量增加 10 %。橙色盐红菌