无机磷细菌培养基(不含琼脂)是专为“溶磷菌”筛选与活性测定设计的合成液体培养基。其配方精髓在于“难溶磷”:磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕以悬浮颗粒形式存在,不提供任何磷;葡萄糖或甘露醇担任碳源,硫酸铵为氮源,并辅以Mg²⁺、K⁺、微量元素及磷酸盐缓冲液,pH稳定在6.8–7.2。唯有能分泌有机酸、质子或磷酸酶的细菌,方可将不溶性磷转化为可溶PO₄³⁻,供自身同化并释放到液相中,使原本乳白的悬浊液逐渐澄清,上清有效磷浓度上升,实现“溶磷”可视化与可量化。实验流程简洁高效:250 mL三角瓶装50 mL培养液,接入土壤或根际稀释液,28℃、170 r/min振荡培养5–7天;每24 h取样离心,钼锑抗比色法测定钼蓝吸光度,绘制“溶磷-时间”曲线。高效菌株72 h内上清磷浓度可突破200 mg·L⁻¹,pH降至4.5以下,溶磷率与酸度呈明显负相关。若需高通量比较,可改用96深孔板,同步测定OD₆₀₀与可溶性磷,计算单位生物量溶磷效率,快速锁定优良菌株。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋或磁力搅拌重悬;背景可溶磷须低于0.5 mg·L⁻¹,避免假阳性。储存过程若出现絮凝,多为钙-蛋白复合物,可超声打散,不影响活性。鲑色野野村氏菌革兰氏阳性,基丝和气丝极多分枝。气丝上产生钩状、螺旋形或直孢子链,孢子表面光滑或有疣。丛花青霉
长赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus macroides)是2013年从鲤肠道中分离的新成员,因细胞呈长杆、链状排列而得名。它能在1/2LB培养基上形成浅褐色、光滑、直径约1mm的菌落,革兰氏阳性,具周生鞭毛,可产卵圆形芽孢,耐pH6–9、盐0–6%,更适温度35–37℃,对干旱、高温和胆汁盐均有良好适应力。其“本领”在于三酶合一:吲哚乙酸(IAA)分泌量达18mg/L,可刺激小麦根长增加35%;ACC脱氨酶活性降低植物乙烯水平,缓解盐胁迫;铁载体与蛋白酶协同,可抑制番茄青枯、辣椒疫霉等病原菌,抑菌带宽22–28mm。山东大棚试验显示,用长赖氨酸芽孢杆菌菌液灌根,番茄根结线虫侵染率下降42%,果实Vc含量提高12%,产量增8.3%。工业端,菌株ZJB-17009的酯酶对N-苯乙酰-DL-氨基酸水解选择性达99%,已被用于绿色合成L-氨基酸;另一株C1在白酒窖池可产己酸和乙酸乙酯,使基酒主体香提高30%,为“增香菌”提供新选择。未来,借助合成生物学,长赖氨酸芽孢杆菌有望被植入耐盐、产聚-γ-谷氨酸模块,成为盐碱地“一菌多效”的先锋,让贫瘠土地也飘出丰收香。环带青霉解硫胺素类芽孢杆菌还具有生物转化能力,能够将一些复杂的有机化合物转化为更有价值的产物。

解淀粉芽孢杆菌是土壤里藏着的一把“生物刀”。它在营养充足时长成杆状,一遇干旱、高温便缩成厚壁芽孢,可耐沸水煮十分钟、紫外曝晒三小时,十年后遇水仍能萌发。复苏后,它先分泌α-淀粉酶、葡聚糖酶,把作物根际的淀粉、果胶切成低聚糖,抢得碳源,同时释放表面活性素、伊枯草菌素等脂肽,像微型剪刀刺破病原菌膜,对白绢、枯萎、灰霉的抑制率超过七成;还能诱导植物开启系统抗性,番茄未染病就先“武装”叶片。温室试验显示,每亩用两百克菌粉拌基质,黄瓜枯萎率降四成,农药少打一半,果实仍青亮。更妙的是,它能将难溶磷酸钙转化为有效磷,并分泌植物素前体,使玉米须根量增三成,亩产提8%。东北连作大豆田因它缓解“磷饥饿”,减少化肥施用量一成。如今,生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。科学家还在其基因组里插入耐盐基因,让它在西北盐碱地也能萌发,为弃荒滩涂夺回粮田。解淀粉芽孢杆菌用肉眼看不见的臂膀,托住绿色农业的明天:让农药瓶少一个,饭碗多一粒,也让板结的土地重新呼吸。
扩散芽孢杆菌(Bacillus diffusus)是芽孢杆菌属里的“运动健将”。菌体杆状、周生鞭毛,在琼脂表面可形成迅速扩展的薄膜状菌落,24 h内直径达80 mm,故得名“diffusus”。其更适生长温度30–37 ℃,pH 6–9,耐干燥、耐紫外,芽孢可存活十年以上,为制剂化提供质量特性。一、快速定殖菌株DSM 13271分泌大量胞外多糖,降低表面张力,使菌体在沙壤土中迁移速度提高3倍;与枯草芽孢杆菌复配,可形成“生物被膜”,优先占据根际生态位,抑制病原菌入侵。二、广谱抑菌扩散芽孢杆菌产生diffusin脂肽,对番茄青枯、辣椒疫霉、棉花黄萎等病原菌抑菌带宽达28 mm;温室试验显示,亩用200 g菌粉滴灌,黄瓜枯萎病指下降45 %,农药用量减少三分之一。三、促生提质菌株IAA产量25 mg·L⁻¹,溶磷2.9 mg·L⁻¹,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导玉米侧根增30 %,吸磷量提20 %;新疆盐碱地示范,冬小麦千粒重增1.5 g,产量提高8 %。四、工业酶潜力其耐碱蛋白酶在pH 10、50 ℃下活性比较高,已用于洗涤剂,低温去污力提升25 %;胞外多糖乳化力强,可作为钻井泥浆降滤失剂,耐盐达12 %。其IAA产量达118mg/L,明显高于同属菌株,可刺激小麦根长增加35%,干重提高28%。

施氏芽孢杆菌(Bacillus smithii)是芽孢杆菌属中少见的“高温工匠”,标准菌株 JCM 9076 更早从堆肥深处分离,可在 30–65 ℃、pH 4.5–9.0 范围内旺盛生长,更适温度 55 ℃,芽孢耐 100 ℃沸水 2 h 仍存活,是验证高压蒸汽灭菌的指示菌之一。其耐热关键在于芽孢内高浓度吡啶二羧酸钙(DPA-Ca)结合低水分状态,配合小分子热休克蛋白,使酶与 DNA 在高温下依旧稳定。2024 年,中国团队从湖南镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2(保藏号 CCTCC M2024167),鉴定为 B. smithii。该菌可在 50 mg L⁻¹ Cd²⁺、6 % NaCl 条件下正常分泌有机酸,将难溶磷酸钙转化为磷,盆栽玉米根际有效磷提高 42 %,籽粒镉含量下降 35 %,实现“增磷减镉”同步完成。在工业酶方向,施氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其耐碱性 α-淀粉酶更适温度 70 ℃,在淀粉液化、纺织退浆中可省去降温环节,节能 15 %;耐热蛋白酶在 60 ℃、30 % 乙醇中仍保持 80 % 活性,为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上,M2 菌株与秸秆堆肥复配,可使堆体 24 h 升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d;作为功能性菌剂,每亩基施 200 g 菌粉,冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %,分蘖数增加 1.2 个,对后期倒伏有明显缓解作用。这种细菌因其独特的生物学特性和潜在的应用价值,成为微生物研究中的重要对象。牛肾盂炎棒杆菌
解蛋白奇异球菌的培养相对容易,通常在特定的培养基上生长良好。丛花青霉
MY培养基(Malt-Yeast Extract Medium)是“麦芽-酵母”双营养的经典富集培养基,配方简洁却营养爆棚:麦芽浸粉20 g、酵母粉4 g、葡萄糖10 g,补水至1 L,pH自然5.6±0.2,无需调节即可释放麦芽淀粉酶持续供糖,形成“缓释碳源”效应。其低pH与高还原糖组合,既能抑制多数细菌蔓延,又为酵母、丝状菌及嗜酸微藻提供“即食”氮碳,是实验室摇瓶、工业菌种活化与次级代谢研究的“第一步”。在酿酒酵母中,30℃、200 r/min培养16 h,OD₆₀₀轻松破1.5,细胞活性>95%,直接转接乙醇发酵罐可缩短延滞期6 h;若用于产赤霉素藤仓镰刀菌,只需将葡萄糖降至5 g,并补加0.5 g NH₄NO₃,28℃静置5天,赤霉素GA₃产量可达320 mg L⁻¹,比PDB提高40%。MY培养基的另一优势是“可视化”:含2%琼脂即成MYA平板,菌落形态饱满、色素鲜艳,青霉呈蓝绿,红酵母显玫瑰红,常被用作教学示范板。质量控制亦轻松:高压后若颜色加深,说明美拉德反应过度,可改用115℃灭菌20 min;室温存放1个月仍澄清,即可继续使用。凭借其组分明确、成本低廉、配制快速,MY培养基已从传统酿酒实验室走向合成生物学、次级代谢与益生菌高密度发酵,成为微生物学家手中“养菌如泡茶”的经典底牌。丛花青霉