铜绿假单胞菌在25-37摄氏度较适宜生长繁殖,在碳源充足(也就是有机质丰富)时约20--30分钟繁殖一代,超过48摄氏度后生长繁殖受到抑制,但也能繁殖,在60摄氏度条件下可长期存活,在120摄氏度条件下可存活20分钟。水分是铜绿假单胞菌生长的先决条件,在缺少水分的条件下,铜绿假单胞菌表现为芽孢状态(休眠),不能生长和繁殖。在土壤湿度低于15%时,铜绿假单胞菌不能正常生长和繁殖。当土壤湿度在30-45%范围内较适宜铜绿假单胞菌的生长繁殖。实际上,当土壤湿度大于45%时,并不影响铜绿假单胞菌的生长和繁殖,但是这个湿度条件往往对农作物不利。大肠杆菌是条件致病菌。丛枝菌根菌株
大肠杆菌摇瓶发酵常用的化学合成培养基有LB、SOB、SOC等。培养基中通常含有碳(能)源、氮源,以及微营养物如微生物和微量元素,这些营养物的浓度与比例,对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。培养基中复合氮源的种类对重组大肠杆菌的高密度发酵也很重要。在某些情况下,向培养基中添加一些营养物质能提高生产率。这些营养物的作用可能是作为产物前体,也有可能是阻止产物的降解。发酵过程:1、种子活化:将保存于-80℃的种子甘油菌室温解冻,取500ul菌接入50mlLB培养基,再加入相对应的筛选抗性,37℃培养7h。2、上罐:将上步活化的种子50ml接入3L发酵培养基中,设定温度,空气流量,压力值,监控DO与PH值。3、从发酵4小时开始,每隔1h进行取样检测OD,当OD值≥40时,开始诱导。4、诱导物:IPTG(1mol/L,过滤除菌),加入4ml,至终浓度达到1mmol/L,诱导阶段温度控制再35℃,其他条件不变,诱导10小时。5、诱导结束,放罐,5000rpm离心,收集菌体,于-80℃冰箱保存。葡萄牙棒孢酵母菌种大肠杆菌的抗原成分复杂,可分为菌体抗原(O)、鞭毛抗原(H)和表面抗原(K)。
大肠杆菌的生物学特征:1、理化特性大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为f型。
使用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌时,若采用1.5毫升离心管保存菌种,移种时要特别注意无菌操作,尽量采用螺口的带盖冷冻管保存菌种,以减少污染的机会。采用螺口的带盖冷冻管的方法保存肠杆菌科的细菌及革兰阳性需氧杆菌如炭疽芽孢杆菌、腊样芽孢杆菌等均取得良好的保存效果。铜绿假单胞菌保存低温存法,简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。葡萄球菌的表示种有金黄色葡萄球菌。
大肠杆菌常见的一种不以进化亲缘关系为基础的细分系统是血清型,它是基于主要的表面抗原(O抗原:部分脂多糖层。H:鞭毛蛋白。K抗原:包膜),如O157:H7)。然而,通常只引用血清组,即o抗原。目前,已知大约190个血清群[28]。常见的实验室菌株有一种能阻止o抗原形成的突变,因此是不可分型的。像所有生命形式一样,新品种的大肠杆菌通过突变、基因复制和水平基因转移的自然生物过程进化。特别是,自与沙门氏菌分离以来,实验室菌株MG1655的18%的基因组是水平获取的。大肠杆菌K-12和大肠杆菌b菌株是实验室至常用的品种。一些菌株会产生对宿主动物有害的特性。这些强毒株通常会引起一轮腹泻,这种腹泻在健康成人中通常是自限性的,但在发展中国家通常对儿童是致命的。毒性更强的菌株,例如O157:H7,可导致老年人、极年幼者或免疫功能低下者的严重疾病或死亡。金黄色葡萄球菌的应用广,但是主要是用来做科学研究用途。食半乳聚糖卓贝尔氏黄杆菌
金黄色葡萄球常见于人和动物的皮肤及与外界相通的腔道中。丛枝菌根菌株
枯草芽孢杆菌能提高动物生产性能是其产生多种消化酶的一个重要体现。芽孢杆菌为需氧菌,在生长过程中需要大量的氧气,进入动物肠道内,消耗大量的游离氧,降低肠道内氧浓度和氧化还原电势,改善了乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长环境,保持肠道微生态系统的稳衡,提高动物机体抗病能力,减少胃肠道疾病发生几率。拮抗致病微生物,改善体内外生态环境,动物饲喂枯草芽孢杆菌后,能明显降低肠道大肠杆菌、产气荚膜梭菌、沙门氏菌的数量,使机体内的有益菌增加而潜在的致病菌减少,因而排泄物、分泌物中的有益菌数量增多,致病性微生物减少,从而净化体内外环境,减少疾病的发生。丛枝菌根菌株
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