铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一,有时呈球杆状或线状,成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛,在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。铜绿假单胞菌为专性需氧菌,生长温度范围25~42摄氏度,较适生长温度为25~30摄氏度,特别是铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长,而在42摄氏度可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。在血平板上会有透明溶血环。铜绿假单胞菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。o抗原含有内毒养素和原内毒养素蛋白质两种成份。原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,原性强的保护性抗原,不只存在于不同血清型铜绿假单胞菌中。铜绿假单胞菌中的O抗原可用以分型。西北奇异球菌
枯草芽孢杆菌用量少,为减少浪费,兑药时应用小容器将所需用量药剂充分溶解后再倒入喷雾器中,加水至喷雾器较佳水平线进行喷雾;早上10点前或下午4点后施药,避免阳光直射,杀死芽孢。尤其是4点后用药,夜间潮湿的环境更有利于芽孢萌发。不能与铜制剂、链霉素等杀菌剂及碱性农药混用;病害初期或发病前施药效果较佳,施药时注意使药液均匀喷至作物各部位。枯草芽孢杆菌的溶菌作用主要表现在是通过吸附在病原菌的菌丝上,并随着菌丝生长而生长,而后产生溶菌物质造成原生质泄露使得菌丝体断裂;或者是产生抗类菌物质通过溶解病原菌孢子的细胞壁或细胞膜,致使细胞壁穿孔、畸形等现象从而抑制孢子萌发。青栗链霉菌菌株铜绿假单胞菌在血平板上会有透明溶血环。
检测铜绿假单胞菌的注意事项,采用无菌操作进行检测,做好器具、环境的灭菌工作。均匀取样,应保证所取样品具有代表性。对样品进行前处理时,严格遵守操作规程,保证样品溶液的振荡次数,使其充分混匀。画线分离培养是检测铜绿假单胞菌的关键步骤。分离培养得到的单个菌落越多越利于提高检出率。做革兰氏染色时,涂片要薄厚均匀,菌体密度适宜。氧化酶试验结果是判定铜绿假单胞菌是否存在的重要依据。可将其作为筛选试验。如氧化酶试验结果为阴性,则不必再进行后续试验,即可判定为未检出铜绿假单胞菌。1%二甲基对苯二胺试液放置时间延长,试液颜色会逐渐变深,所以要现用现配。挑取菌落时要用玻璃棒,也可用木质或竹制小棒代替,尽量不要使用金属丝或金属棒,防止试验出现假阳性。
金黄色葡萄球,甘油菌和斜面试管菌种作为定性菌种,可以直接用于继续传代,用来做上述应用。定量菌液有不同的浓度,主要是用于口罩阻菌性能验证及其他相关检测,需要干冰运输,-80度保存。按照《WS/T774-2021期间现场消毒评价标准》制成传染钢片和染菌布片,就是把10的6次方个金黄色葡萄球菌涂布到钢片上,用来做消毒效果评价指示菌片。金黄色葡萄球菌的应用广,但是主要是用来做科学研究用途。甘油菌液和斜面试管比较便宜,45元/支,现货供应。冻干粉菌种按照规定属于0代,现货,现货库存。其中甘油菌可以加冰袋运输,斜面试管可以常温运输。甘油菌液需要在-80度保存,保质期可以1-2年。斜面试管保存条件不高,4-10度就可以保存,保质期3个月。)铜绿假单胞菌生长对营养要求不高。
从作物的根际土壤、根表、植株及叶片上分离筛选出的枯草芽孢杆菌菌株对不同作物的众多真类菌和细菌病害具有拮抗作用。如粮食作物中的水稻纹枯病、稻瘟病,小麦纹枯病,豆类根腐病等;蔬菜病害中的番茄叶病、枯萎病,黄瓜枯萎病菌、霜霉病,茄子灰霉病和辣椒疫病等。枯草芽孢杆菌还可以控制采后水果的多种病害,如苹果霉心病,柑橘青霉病,油桃褐腐病,草莓灰霉病和香蕉枯萎病、冠腐病、炭疽病,苹果及梨青霉病、黑斑病、溃疡病,金花梨果腐病等。此外,枯草芽孢杆菌对杨树溃疡病、腐烂病、树黑斑病及炭疽病,茶轮斑病,炭疽病、黑胫病、赤星病菌、根腐病,棉花立枯病、枯萎病等也有较好的防治作用。枯草芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性,促进饲料中营养素降解。玉米野野村氏菌
铜绿假单胞菌菌种不能在4-10度条件下储存,容易死亡。西北奇异球菌
通常,铜绿假单胞杆菌温度太高,有时会得不到扩增产物;铜绿假单胞杆菌温度太低时,容易发生非特异性反应。另外,时间太短时,会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成。传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6摄氏度冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。西北奇异球菌
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