江西PUYU左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

GB29989食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。

原理试样经过水提取，用高氯酸沉淀蛋白质后过滤。滤液经碱皂化后使溶液中结合态的左旋肉碱游离出来。左旋肉碱与乙酰辅酶A在乙酰肉碱转移酶的催化下反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶A。游离的辅酶A和2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质，其颜色深浅与游离的辅酶A含量成正比。因游离的辅酶A与左旋肉碱是等摩尔反应关系，可间接求出试样中左旋肉碱含量。

试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。

试剂 高氯酸(HClO4)。 氢氧化钠(NaOH)。氢氧化钾(KOH)。 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。 N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na2·2H2O）。 乙酰辅酶A（AcetylCoA）：在2℃~8℃保存。 乙酰肉碱转移酶(CAT)：在2℃~8℃保存。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，有需求可以来电咨询！江西PUYU左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

GB29989 食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

试剂配制

高氯酸溶液（13%）：13mL高氯酸稀释至100mL。

氢氧化钠溶液（10mol/L）：称取40g氢氧化钠用水溶解，冷却后稀释至100mL。3.2.3氢氧化钾溶液（4.0mol/L）：称取22.4g氢氧化钾用水溶解，冷却后稀释至100mL。

显色储备液：分别称取50mg2-硝基苯甲酸、5.96gN-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185mg乙二胺四乙酸二钠溶于30mL去离子水中，用10mol/LNaOH溶液调pH至7.4～7.6，然后用水定容至50mL。此液置于4℃冰箱中可保存3个月。

显色工作液：吸取5.0mL显色储备液用水定容至25mL。

乙酰辅酶A（AcetylCoA）溶液：称取20.0mg乙酰辅酶A溶于2.0mL水中。临用时配制。 江苏左旋肉碱测定用试剂上海普誉科贸有限公司 左旋肉碱测定用获得众多用户的认可。

乙酰辅酶A

肉碱乙酰转移酶乙酰肉碱转移酶

5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)69-78-3

N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9

HEPES

乙酰辅酶A三锂盐

左旋肉碱L-肉碱541-15-1

维生素BT541-15-1

乙酰辅酶A是能源物质代谢的重要中间代谢产物，在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路——三羧酸循环和氧化磷酸化，经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水，释放能量用以ATP的合成。乙酰辅酶A是合成脂肪酸、酮体等能源物质的前体物质，也是合成胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。用于乳品肉碱的检测普誉公司为您提供各种规格乙酰辅酶A

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

荧光光度法

MitsuoMaehara等14(1988)采用一种简单的荧光法对血清中游离肉碱进行测定,测定原理与分光光度法基本类似。肉碱与乙酷CoA在CAT的催化下反应生成乙酷肉碱和COASH，COASH与BIPM耦合生产强荧光物质COA-BIPM光强度与肉碱的含量成正比。通过测定荧光强度,可以得知血清中的肉碱含量。该方法的批内和批间变异系数(C分别为5.2%和2.6%,肉碱回收率在98%~113%之间与显色法的测定结果相比具有良好的相关性(相关系数r>0.90)。该方法灵敏度较高,比较低检测限为10pmol/L。KojiroMatsumoto等[15](1990)开发了光流动注射法对丙戊酸***的患者血清中的肉碱进行测定。该方法使用了肉碱脱氢酶(CDH)和硫辛酷胺脱氢酶(DS)两种固定化酶催化两步反应***是肉碱和氧化型辅酶I(NAD+)在CDH的催化下反应生成还原型辅酶I(NADH)第二步是NADH和刃天青(C12H7NO4)在DS的催化下反应生成物质试灵(C12H7NO3)试卤灵的荧光强度与肉碱的含量成正比。用该方法检测肉碱时,肉碱的标准曲线在0.1~1.0nmol范围内线性测的激发光波长和发光波长分别为560nm和580nm。 上海普誉科贸有限公司 左旋肉碱测定用值得用户放心。

乙酰辅酶A是辅酶A的乙酰化形式，可以看作是活化了的乙酸。基团(CH3CO-=乙酰基)与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是高能键硫酯键。它是脂肪酸的β-氧化及糖酵解后产生的**酸氧化脱羧的产物。在许多代谢过程中起着关键的作用。

乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，它是**酸脱羧，脂肪酸的β-氧化的产物。当**酸激进入线粒体的基质后，它会被**酸脱氢酶复合体转化为乙酰辅酶A，因为在此过程中，**酸会被氧化（氢原子转移到NADH+）及其羧基会以二氧化碳的形式离开，故此过程被称为**酸脱羧。同时，它是脂肪酸合成，胆固醇合成和生酮作用的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，欢迎新老客户来电！安徽GB29989用左旋肉碱测定用试剂硝基苯甲酸

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试剂的组成和配制试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。试剂二：粉剂×1支，-20℃保存。临用前加入250μL试剂五充分溶解备用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。试剂三：液体10μL×1支，4℃保存。临用前加入250μL试剂五充分溶解备用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存。临用前加入22.5mL试剂五充分溶解备用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。试剂五：液体30mL×1瓶，4℃保存。工作液的配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.92mL），将试剂二、三和四按照1:1:90的比例混合，或者直接把试剂二和试剂三加入到试剂四中混匀（可以测定24样）；加样前置37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴锅中预热30min；现配现用；江西PUYU左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

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