胎牛血清(FBS)是来自胎牛的凝结血液的液体部分，不含细胞、纤维蛋白和凝血因子，但含有大量对细胞生长至关重要的营养和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生长因子对于培养细胞的维持和生长至关重要。FBS还含有多种小分子，如氨基酸、糖、脂质和Hormone。FBS应用普遍。FBS的主要用途之一是在真核细胞培养中，其浓度高达2...

  聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DN段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的很大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。发...

  胎牛血清FBS的处理方法？胎牛血清FBS一般需要冷冻保存，在-5到-20°C之间，并且可以在2到8°C的温度下解冻。将血清等分并冷冻在较小的部分（通常为50ml试管）中通常很有用，以避免多次冷冻和解冻循环。有时，一些FBS等分试样在冷冻温度下仍保留在液体中。这是由于缺乏用于开始结晶（冷冻）的成核中心（颗粒物质）。如果您只是用手指轻弹管子，...

  胎牛血清的生产工艺：胎牛血清适合脉冲示踪实验（同位素标记研究细胞代谢）适合转染CHO后的筛选，避免外源小分子对细胞产生干扰。透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的。胎牛血清在无菌条件下要经过0.1微米膜三重过滤，要进行一系列的检测，包括理化性质检查（如渗透压和pH值），成分检查（如内的毒性和血红蛋白）、外源因子检查（如细菌、病毒和支原...

  Real-time PCR实验常用的RNA酶抑制剂：1.焦磷酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。2.异硫氰酸胍：目前被认为是较有效的RNA酶抑制剂，它在裂解组织的同时也使RNA酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从蛋白中解离出来，又对RNA酶有强...

  膜片钳技术：膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来，由于电极与细胞膜的高阻封接，在电极笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离，因此，此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管，用一个极为敏感的电流监视器（膜片钳放大器）测量此电流强度，就替代单一离子通道电流。膜片钳技术的建立，对...

  膜片钳技术：膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来，由于电极与细胞膜的高阻封接，在电极笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离，因此，此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管，用一个极为敏感的电流监视器（膜片钳放大器）测量此电流强度，就替代单一离子通道电流。膜片钳技术的建立，对...

  胎牛血清：解冻胎牛血清时，请按照规定的的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，胎牛血清会变得混浊，同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受...

  胎牛血清有必要做热灭活吗?实验证明，经过正确处理的热灭活胎牛血清，对于大多数的细胞而言都是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至可能因为高温处理影响了血清的质量，从而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清，沉淀物的形成会明显的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为...

  Real-timePCR的反应条件：dNTP浓度过高会加快反应速度，但同时还可以增加碱基的错误掺入率。引物浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增。TaqDNA聚合酶浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增，低则合成产物量减少。TaqDNA聚合酶无校正功能，掺入错误率达2*E-4个核苷酸，一个30个循环的扩增反应0.1%-0.25%总错误率。在9...

  聚合酶链式反应：因为PCR扩增了目的DNA区域，所以PCR可以用于分析极少量的样品。这对于法医检定法，当时只有微量的DNA可作为证据。聚合酶链反应也可用于分析古代DNA那已经有数万年的历史了。这些基于聚合酶链反应的技术已经成功地应用于动物身上，例如四万年前猛犸，以及人类DNA，定量聚合酶链反应或者实时聚合酶链反应不要与逆转录-聚合酶链反应...

  Real-time PCR链式反应的特点：灵敏度高：PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12）量级的起始待测模板扩增到微克（μg=-6）水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位）；在细菌学中很小检出率为3个细菌。简便、快速：PCR反应用耐高温的TaqDNA...