外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物,包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等,从论文发表数量统计来看,外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比,在提取和质控上差异较大,不能延用目前主流的产品和技术;同时,外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案,这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比,有一些差异:1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染;2.外泌体RNA非常微量;3.外泌体RNA中小RNA含量比较高;4.常规的RNA质控方法不适用。综上,对外泌体RNA研究人员,需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法,配合严谨的外泌体RNA质控方法,才能呈现出良好的、准确的、严谨的研究数据和科学结论。针对以上问题,维思克思推荐使用外泌体RNA提取试剂盒(WSR0004-3)、氯仿替代物(WZ13)、外泌体RNA质控试剂盒(WSR0013-1)、外泌体RNA定量试剂盒(WSR0039)。外泌体研究工具一体化实验方案,从提取到分析全覆盖,降低综合投入。蓝莓Extracellular Vesicles解决方案

外泌体作为近几年的“科研新贵”,可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的递送载体。然而,目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点:痛点一:由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入,尤其是在体内行为方面上,将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色,沟通能力和行动机制。痛点二:目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列),然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明专利,对比其他染色方法,该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势!发明名称:1.一种pH敏感型探针分子及其应用;2.一种探针分子的合成方法。WSR0001-2工作原理为共价方式嵌入外泌体膜结构。当染料结合外泌体膜后,可通过荧光显微镜准确观察到外泌体在细胞内运动与行踪。突出优势:特异性高,无背景干扰;标记效率高,该探针以共价的方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构,优于亲脂性染料,避免自组装形成的纳米粒子造成信号干扰。在低pH(酸性)条件下也可显色。高通量Extracellular Vesicles表征外泌体研究工具原料利用率优化,降低单位实验成本,提升性价比。

外泌体的保存是否重要?在外泌体研究中,储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中,置于-80℃分装冻存,但随着冻存时间和冻融次数的增加,将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点,维思克思开发出外泌体的冻存保存液,直接混入外泌体样本中,置于-20℃、-80℃冻存,可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点:操作简便,可直接混入外泌体样本中,无需过多操作。保护效果好,使用后外泌体生物活性稳定,多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广,可适用于所有外泌体样本(包括植物、动物、微生物、人来源外泌体)。产品信息:WisExoExosomeProtector(WSR0020)
维思克思的外泌体浓缩方案-超滤管02超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术,利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜,利用膜孔的大小选择性,将分子量较大的物质过滤出来,而将分子量较小的物质通过膜孔。本产品基于低蛋白吸附的过滤膜,根据膜的大小规格以达到样本浓缩或分离的效果。具有操作简单,离心时间短,回收率高等特点。可用于生物样品浓缩,分离,蛋白除杂等领域。使用方法:1.样本澄清通过膜过滤样本,使样本澄清,去除杂质。2.超滤管平衡超滤管中加入适量PBS,在转子中离心。移去装置底部PBS。3.样品超滤向超滤管中加入5ml样品,离心。弃除收集管中液体,回收浓缩样品。外泌体研究工具主要技术自主研发,持续迭代升级,提升研究价值。

外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等,但业内人事认为,外泌体的分离之难,在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析,什么样的外泌体才是高质量的,以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法,目前行业内基本上是一致的:通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量,使用较多的还是颗粒数。众所周知,外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡,比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物,比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等,并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质,在计算颗粒数时,不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量,可能有其局限性。外泌体研究工具长效活性维持,多次使用仍稳定,降低重复采购频率。维思克思生物科技Exosome分离
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外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性?目前,对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白,以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中,CD9也是如此。然而,检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体(Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞)。同样重要的是,通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色,来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是,用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA?一般认为外泌体中不包含DNA,或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物,而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现,在外泌体的表面,称之为“corona”,中文叫“冠“或”晕“,在外泌体分泌到细胞外后,会吸附微量的游离DNA。蓝莓Extracellular Vesicles解决方案
维思克思生物科技(武汉)有限公司汇集了大量的优秀人才,集企业奇思,创经济奇迹,一群有梦想有朝气的团队不断在前进的道路上开创新天地,绘画新蓝图,在湖北省等地区的机械及行业设备中始终保持良好的信誉,信奉着“争取每一个客户不容易,失去每一个用户很简单”的理念,市场是企业的方向,质量是企业的生命,在公司有效方针的领导下,全体上下,团结一致,共同进退,**协力把各方面工作做得更好,努力开创工作的新局面,公司的新高度,未来维思克思生物科技供应和您一起奔向更美好的未来,即使现在有一点小小的成绩,也不足以骄傲,过去的种种都已成为昨日我们只有总结经验,才能继续上路,让我们一起点燃新的希望,放飞新的梦想!
外泌体研究常见问题解答119.在分离过程中,外泌体含量会发生变化吗?准备的步骤越少,结果越好。很明显,即使你是一个非常熟练的操作员,将超离作为预富集步骤也会导致囊泡的损失。因此,即使囊泡的纯度很高,也无法控制哪些囊泡在处理过程中的丢失。10.为什么沉淀法或超速离心法提取的外泌体看不到沉淀?这种问题通常有三种可能性:1)使用的样本体积太小或外泌体含量太低。2)使用了不透明的超速离心管,一般来说外泌体产量都比较小,不透明管底很难见到明显沉淀的,可以当作有沉淀,继续往后操作即可。3)使用了粘附性低的耗材。部分角转管壁粘附性很低,沉淀很难富集或沉淀很容易滑落,请圆底离心管离心。11.外泌体和微囊泡可以...