在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较
图片由芝加哥大学肺和重症护理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用 LipoD293™试剂(左图)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右图)分别将 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染 24 小时后,用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光,以此来评价转染效率。
对难转染细胞 LNCap 细胞转染效率的比较
在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较
图片由罗斯威尔公园**研究所(Roswell Cancer Institute)
研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。贴壁细胞系转染试剂选购
细胞转染如果以上都没有问题,那么******重要的环节就是慢***质粒转染293T细胞了,转染效果直接影响着出毒效率,那么一款好的转染试剂在此时就是至关重要了!在这里给大家推荐一款性价比超高的转染试剂,美国Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也称为游离碱PEI22K)是一种功能强大,值得信赖且经济高效的瞬时转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中,能在96孔板至100L生物反应器范围内提供始终如一高效的基因表达。越来越多的研究人员和公司使用PEI来替代其他类型转染试剂,以获得他们所需要的优势。相较于其他类型转染试剂,使用自行制备的PEI转染试剂可以使总转染成本降低高达40%左右。ThomasM,etal(2005)研究数据表明,去乙酰化的PEI40000(PolyethylenimineMAX40000)体外质粒DNA转染效率提高21倍,小鼠体内靶向效率达到10000倍,随之肺部特异疗效显示增强1500倍。贴壁细胞系转染试剂选购谁来拯救我的细胞之QIAGEN转染试剂.
LipoFectMax™转染试剂LipoFectMax™转染试剂具有以下几个优点:高转染效率,适用于多种细胞系对细胞毒性低适用于DNA和RNA的转染转染前无需去除细胞培养基或血清转染后无需清洗细胞或更换培养基转染效率高,适用于多种细胞系图1.LipoFectMax™转染试剂以绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒转染几种常见细胞系,通过检测GFP信号比较转染效率。细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。
Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用,并不断开发和增强其性能。公司秉承为应用而研发,目前已拥有超过3000种产品。质量保证1、遵循ISO 13485质量管理认证
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用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFPcDNA,右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.用了这个转染试剂,慢***再也不用怕转不进去了!贴壁细胞系转染试剂选购
细胞转染必备——高效低毒转染试剂.贴壁细胞系转染试剂选购
基于磷酸钙成分的转染试剂,其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物,粘附到细胞膜表面,借助内吞作用进入细胞质。pH值,钙离子浓度,DNA浓度,沉淀时间,细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响,因此实验条件摸索和优化时间较长,且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。此方法操作简单,重复性好,在体外转染中有很高的效率,但具有一定的细胞毒性,可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响,需要去除血清。贴壁细胞系转染试剂选购
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