企业商机
转染试剂企业商机

.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。高灵活应用,同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。上海动物细胞转染试剂分装

在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较图片由芝加哥大学肺和重症护理系的NickolaiDulin博士友情提供制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂(左图)和Lipofecatmine2000(L2K,右图)分别将GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后,用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较图片由罗斯威尔公园**研究所(RoswellCancerInstitute)的LynGao博士友情提供罗氏转染试剂供应商.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。

转染48小时后,使用尼康荧光显微镜GFP荧光进行成像(左侧四幅图),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.带有6xHis标记的GFP荧光蛋白使用Ni-NTA亲和柱技术实现分离。5微升洗脱液载入SDS-PAGE凝胶电泳分离并进行Coomassie亮蓝染色(右上图E),道1为LipoD293293、道2为标准蛋白分子、道3为Xfect、道4为293fectin和道5为Fugene6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量(见右下图F)。产生慢***的比较通过LipoD293™试剂(升级版)和LipofectamineLTX(LTX)试剂将三个cDNAs共转染进293T细胞。一个GFP载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用来测定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1微升(上图)和10微升(下图)。

转染是将外源核酸导入真核细胞的过程,是细胞和分子生物学研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了",真所谓辛辛苦苦实验N多回,一夜回到解放前……众所周知,影响转染成功的因素非常多,包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同,现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24 h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

简介:X-tremeGENEHPDNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:1.简单易用的多组分混合试剂,无动物源性成分,室温稳定。2.高转染效率,对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。3.使用细胞毒性低的试剂,结果相关性好。图2.X-tremeGENEHP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENEHP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENEHP,导致存活细胞量减少(图片来源于网络)。国产转染试剂制作原理是什么?动物转染试剂原理

各种转染试剂成分分析.上海动物细胞转染试剂分装

图3.用于转染的Invivofectamine3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。高效、靶向敲低在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果图4.使用Invivofectamine3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine3.0试剂与靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。上海动物细胞转染试剂分装

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