基于磷酸钙成分的转染试剂,其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物,粘附到细胞膜表面,借助内吞作用进入细胞质。pH值,钙离子浓度,DNA浓度,沉淀时间,细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响,因此实验条件摸索和优化时间较长,且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。此方法操作简单,重复性好,在体外转染中有很高的效率,但具有一定的细胞毒性,可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响,需要去除血清。赛默飞提供了多种高质量的转染产品,适用于各种细胞类型的转染。上海sirna转染试剂哪种好
细胞转染过程:X-tremeGENE 9 DNA 转染试剂 简介:
X-tremeGENE 9 DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂,溶于80%乙醇中,经0.2 μm滤膜过滤,然后封装于玻璃小瓶中,适用于细胞分析的多种实验。
优势:1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高,生成可信任的生理学相关数据。
2.操作简便、节省时间,只需对X-tremeGENE 9 DNA转染试剂进行简单稀释,再与质粒DNA共同孵育,即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。
3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作。 上海sirna转染试剂哪种好转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞.
将胶质瘤干细胞(3×105)接种至6孔板中,然后使用riboFECTCP转染试剂分别将5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA转染进胶质瘤干细胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots检测siRNA***效率。结果发现DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为53.21%、47.46%和46.31%。将1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以产生转染混合物。然后将混合物加入DMEM(siRNA浓度:50nM)中,与原代小胶质细胞培养48h。RT-PCR和westernblot分析检测转染效率。结果发现转染TREM-1siRNA后******了OGD诱导的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上调。
siRNA,加入HiperFect转染试剂混匀并温育5-10min,将混合物逐滴加入培养皿中混匀,培养细胞直到适当的时候检测基因沉默效果。这个快速操作流程简便到还可以用于“反向转染”,方便至极。当然,习惯用传统方法也是可以的,只要培养到细胞汇合度50%—80%进行转染就可以了。没有禁用血清、***的困扰,HiperFect真的是将实验简化到了***。适合多种细胞类型:HiPerfect可高效转染多种细胞类型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。对于原代细胞,产品手册中列出了转染原代HUVEC、成纤维细胞、角质细胞、上皮细胞和平滑肌细胞的操作步骤,贴心包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型)提供如此简便、高效的siRNA输送效果。
转染是将外源核酸导入真核细胞的过程,是细胞和分子生物学研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了",真所谓辛辛苦苦实验N多回,一夜回到解放前……众所周知,影响转染成功的因素非常多,包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同,现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。CycloFect转染试剂,你了解多少?上海sirna转染试剂哪种好
惊艳登场!临床级载体生产必备转染试剂。上海sirna转染试剂哪种好
在选择转染方法时,需考虑您希望输送的运载物(DNA、RNA或蛋白质)以及您希望转染的细胞类型。您可通过下表选择各类阳离子脂质体转染试剂和Neon转染系统。
我们提供了各种DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA输送选择,让您可以对自己的结果更加自信.***的输送效果—可转染多种类型的细胞无毒性作用—您之所以能看到结果,是因为核酸存在,而不是因为试剂需要的优化工作更少—针对大多数细胞类型提供了快速、简便的实验方案
连续细胞系 具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。但由于此类细胞经历过基因改变而变得具有无限增殖能力,它们在培养过程中的表现可能无法必然地反映体内状态。
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