继首代小型化双光子显微镜在国际上获得小鼠自由行为过程中大脑神经元和突触的动态图像后,我们成功研制了第二代小型化双光子显微镜。它具有更大的成像视野和三维成像能力,可以清晰稳定地对自由活动小鼠三维脑区的数千个神经元进行成像,实现对同一批神经元的一个月追踪记录。通过对微光学系统的重新设计系统的。微物镜工作距离延长至1mm,实现无创成像。内嵌可拆卸的快速轴向扫描模块,可采集深度180微米的3D体成像和多平面快速切换的实时成像。该扫描模块由一个快速的电动变焦透镜和一对中继透镜组成,在不同深度成像时可保持放大倍率恒定。其变焦模块重量,研究人员可根据实验需求自由拆卸。此外,新版微型化成像探头可整体即时拔插,极大地简化了实验操作,避免了长周期实验时对动物的干扰。在重复装卸探头同一批神经元时,视场旋转角小于,边界偏差小于35微米。多光子显微镜,提高医学病理诊断的准确性和效率。美国荧光多光子显微镜实验
1,光源、光路高度整合通过精密的设计,将飞秒激光器、扫描振镜、PMT、滤光片组,甚至是单光子荧光光路全套整合在一个不大的扫描头(ScanHead)内,无论扫描头如何移动,扫描头内的光路都可以保持稳定不变,从而实现了超稳定、免维护的特点。2,配合多维度、高精度机械控制系统。扫描头直接架设在一个多维运动的机械装置上,可沿任意方向和角度移动扫描头,方便对动物样本进行多方位的扫描观察。而这在常规方案的多光子显微镜上有很大的实现难度,不但需要多个关节组合的光路导向机构,并且在这些关节旋转的时候,都冒着极大的光路偏移的风险,以至于在使用一段时间后都需要对光路进行再次校准,而这样的问题在我司上则完全不会发生。3.一机多能。bruker多光子显微镜能量脉冲多光子显微镜是一种高分辨率的显微镜技术,利用多光子激发荧光的原理来观察生物样品的细胞结构和功能。
对于两个远距离(相距1-2mm以上)的成像部位,通常采用两个**的路径进行成像;对于相邻区域,通常使用单个物镜的多个光束进行成像。多光束扫描技术必须特别注意激发光束之间的串扰,这可以通过事后光源分离或时空复用来解决。事后光源分离法是指分离光束以消除串扰的算法;时空复用法是指同时使用多个激发光束,每个光束的脉冲在时间上被延迟,使不同光束激发的单个荧光信号可以暂时分离。引入的光束越多,可以成像的神经元越多,但多束会导致荧光衰减时间重叠增加,从而限制了分辨信号源的能力;并且复用对电子设备的工作速度要求很高;大量的光束也需要较高的激光功率来维持单束的信噪比,这样容易导致组织损伤。
对于双光子(2P)成像,散焦和近表面荧光激发是两个相对较大的深度限制因素,而对于三光子(3P)成像,这两个问题**减少。 然而,由于荧光团的吸收截面远小于2P,三光子成像需要更高的脉冲能量才能获得与2P相同激发强度的荧光信号。 功能性3P显微镜比结构性3P显微镜要求更高,后者需要更快的扫描速度以便及时采样神经元活动。 为了在每个像素的停留时间内收集足够的信号,需要更高的脉冲能量。 复杂的行为通常涉及大规模的大脑神经网络,这些网络既有本地连接,也有远程连接。 为了将神经元的活动与行为联系起来,需要同时监测* * *分布的超大型神经元的活动。 大脑中的神经网络将在几十毫秒内处理输入的刺激。 为了理解这种快速神经元动力学,MPM需要快速成像神经元的能力。 快速MPM方法可分为单束扫描技术和多束扫描技术。 双光子显微镜可以在保持细胞活性的情况下进行成像,这对于研究细胞生理学和生物化学过程非常有用。
细胞在受到外界刺激时,随着刺激时间的增长,即使刺激继续存在,Ca2+荧光信号不但不会继续增强,反而会减弱,直至恢复到未加刺激物时的水平。对于细胞受精过程中Ca2+荧光信号的变化情况,研究发现,配了在粘着过程中,Ca2+荧光信号未发生任何变化,而配子之间发生融合作用时,Ca2+荧光信号强度却会出现一个不稳定的峰值,并可持续几分钟。这些现象,对研究受精发育的早期信号及Ca2+在卵细胞和受精卵的发育过程中的作用具有重要的意义。在其它一些生理过程如细胞分裂、胞吐作用等,Ca2+荧光信号强度也会发生很的变化。多光子显微镜-适用于各行各业的观察需求。bruker多光子显微镜能量脉冲
多光子显微镜在生物医学研究中有广泛的应用,可以观察细胞内的亚细胞结构、蛋白质分布、细胞活动等。美国荧光多光子显微镜实验
从产品类型及技术方面来看,正置显微镜占据绝大多数市场。2020年,全球多光子激光扫描正置显微镜市场达到87.30百万美元,预计到2027年该部分市场将达到154.02百万美元,年复合增长率(2021-2027)为8.48%。中国多光子激光扫描正置显微镜市场达到13.32百万美元,预计到2027年该部分市场将达到25.21百万美元,年复合增长率(2021-2027)为9.58%。从产品市场应用情况来看,研究机构为主要应用领域,2020年约占全球市场46.28%。2020年,全球多光子激光扫描显微镜研究机构应用消费量为174台,预计2027年达到349台,2021-2027年复合增长率(CAGR)为9.72%。美国荧光多光子显微镜实验