***做实验需要用正常的细胞摸索合适的细胞密度和培养时间，确定之后再加实验组，同时如果条件允许，设置一组已知高迁移性的细胞作阳性对照。注意细胞小室内外培养基的比例，不要使小室外培养基超过小室内培养基液面。观察细胞时一定要擦去小室内部贴在膜上的细胞。 默克提供的相关产品： Millicell®细胞培养小室：PET膜悬挂式或PCF膜站立式，膜孔径为5 μM或8 μM 药物跨内皮细胞渗透性实验 实验目的： 研究某种药物分子穿透内皮细胞的渗透率细胞检测试剂盒零售多少钱呢？上海酶细胞培养联系人
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取上述200μL细胞液加入小室，下室（培养板）加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同，具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时，依据**细胞类型而定。孵育结束，小心取出细胞小室，吸掉小室上层培养液，PBS清洗一遍，70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min，0.5%结晶紫（2%乙醇或PBS溶解）染色20min，然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料，立即用棉签擦去滤膜上层的细胞，自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞，随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞，然后用33%醋酸脱色，将结晶紫完全洗脱下来，洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。上海酶细胞培养联系人
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