测 注意：所有抗体均使用0.5％NFDM作为封闭剂和Luminata™Forte Western HRP进行测试作为化学发光试剂的底物。 印迹阻止 •SNAPi.d.®2.0系统与比较常用的封闭剂兼容，包括脱脂/低脂干燥牛奶，牛血清白蛋白（BSA）和酪蛋白。许多其他市售阻滞剂也兼容（请参阅表5）。•为了确保比较佳的墨量通过吸墨架，必须完全封闭封闭液溶解且不含所有颗粒物质。在某些情况下，可能有必要降低封闭剂以达到所需的流量。•不建议使用浓度高于0.5％的脱脂/低脂干奶。•封闭剂应在含有0.1％Tween®20的tris或磷酸盐缓冲盐溶液中制备表面活性剂，以降低表面张力并确保封闭剂在印迹架上均匀分布表面。•为确保抗体在孵育步骤中均匀分布，请在封闭液中稀释抗体，包含Tween®20表面活性剂。 如何使上海益启生物的联系电话。虹口区MerckWB实验加速器Merck仪器哪家好
PO缓冲液WBAVDP零零15零零毫升BLOT-QuickBlockerTM试剂WB57-175GM175克;Probumin@牛血清白蛋白8204731零零克5％碱溶性酪蛋白225毫升免疫组织化学（IHC）程序的组件SNAPi.d.@2.0免疫组织化学框架SNAP2FRIHC1个SNAPi.d.92.0IHC幻灯片固定器SNAP2SH2个配件过滤钳，钝端，不锈钢XX62零零零零6P31L真空过滤瓶XX10047051个SNAPi.d.@2.0墨粉辊SNAP2RL1个高输出泵，115伏，60赫兹WP621156零1个高输出泵，100伏，50/60HzWP62100601个高输出泵，220伏，50赫兹WP6222零5零1个真空管，内径6.4毫米x3m（内径4/4英寸x10英尺）MS杨浦区Merck电阻仪Merck仪器上海益启细胞跨膜电阻仪订购方便。
润湿印迹。，对于大多数应用和大多数抗体而言，0.5％的脱脂/低脂干奶溶液可以提供足够的膜的阻塞。注意：请勿使用浓度高于0. 5％的干奶，因为它可能会导致吸墨纸架堵塞膜。如果使用其他封闭溶液，请参阅表5了解兼容性和推荐浓度。●在洗涤，封闭和抗体缓冲液中始终使用0.1％Tween8 20表面活性剂。这将减少溶液的表面张力，并确保孵育过程中抗体在印迹支架中的均匀分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系统中的免疫检测时间很短，因此建议在开始操作之前应准备一抗和二抗稀释液。●MultiBlot固定器所需的稀释抗体的总体积为2.5 mL，Mini blot固定器为5 mL，10 mL用于Midi印迹固定器。，每次需要洗30次（MultiBlot为15毫升），以确保每次洗完后都能完全清洗印迹孵化步骤。
关闭真空。同样，溶液将被吸收到印迹架中，并且表面可能看起来干燥。重要提示：孵育10分钟后，再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟，直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液（对于MultiBlot为15 mL）。重复洗涤步骤3次（共3次）4次洗涤）。12.关闭真空，然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点，并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白，则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育：一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL（对于MultiBlot），5 mL（对于Mini blot）或10 mL（对于Midi blot）1X一抗（浓缩液）通常在标准免疫检测过程中使用）。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话，将其从底座上海益启生物的细胞跨膜电阻仪询价公司电话。
位孔收集盘与底座中的定位销对齐。注意：对于Mini和Midi框架，将单个清洁托盘放置在底座的**。对于多印迹如图所示，在框架上放置两个收集托盘。在MultiBlot框架中运行单点印迹时，将空白的卡放在空的孔中，然后将孔下方的收集盘上有污点。4.将污渍固定框架放回底座上的位置。5.按照《通用规程》第6步和第7步中的指示，应用一抗并进行孵育。6.孵育10分钟后，打开真空并等待一分钟，以确保所有蚂蚁都具有被收集。注意：当同时处理两个框架时，请先对一侧进行吸尘，然后再对另一侧进行吸尘。这确保在每个框架上具有完全的真空力，并改善体积回收率。7.关闭真空并卸下框架。卸下抗体收集盘。8.将抗体转移到合适的容器中进行存储或分析。9.将印迹保持架放回原位，并继续执行通用规程的步骤9。 性能证明图1. B-管蛋上海益启生物Merck仪器订购方便。杨浦区Merck电阻仪Merck仪器
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体回收率差。 印迹大会和总议定书 1.用支撑层（蓝色边缘）握住吸墨纸托并弄湿膜层（白色）在润湿过程中溢出水提供的托盘。不要弄湿支撑层。放置湿的滚动板上的污点固定器。2.如果需要，将印迹预先在甲醇和水中浸湿，然后将其放置在印迹支架中心，蛋白质面朝下。注意：印迹不得超过材料中指定的尺寸必填部分。3.轻轻滚动印迹以去除气泡，然后稀释印迹保持并滚动一次。4.打开吸墨纸固定框架，用力将吸墨纸固定在蛋白质面朝上，然后将其放入框架中。一个缺口吸墨架可确保正确放置在框架中。注意：如果只在框架中运行一个MultiBlot，请放置孔空白卡在第二口井中。5.关闭并锁定框架。加入30 mL封闭溶液（MultiBlot为15毫升）。向下按框架并转动系统旋钮施加真空。当框架完全为空时，关闭真空。注意：如果使用抗体回收托虹口区MerckWB实验加速器Merck仪器哪家好
