抗血清质量的评价在免疫期间,不仅各个不同的动物,而且同一动物在不同的时间内抗血清效价、特异亲合力等都可能发生变化,因而必须经常地采集血测试。只有在对抗血清的效价、特异生、性、亲合力等方面作彻底的评价后,才可使用所取得的抗血清。1、效价抗血清的效价,就是指血清中所含抗体的浓度或含量。效价测定的方法常用的是放射免疫法,此法对所有的抗体均适用。某些由大分子(如蛋白类)抗原所产生的抗体,可用双扩散等方法测定。前者测定的效价极为精确。而后者则粗糙得多。采集血量达到采集血管容积的 1/3 为宜,不要超过 2/3。济宁猪血清生产商
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。如果在37℃或更高的温度解冻血清,血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶,但不改变血清的性能,同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。浑浊和沉淀所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白,导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装到无菌离心管中,以低速离心1~2min,上清液即可直接加入到培养基内使用。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。临沂动物血清生产商细胞培养时,要保证细胞可以顺利生长和增殖,需添加10%~20%的血清,动物血清还可起到酸碱度缓冲液的作用。
何谓热灭活一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和焕活。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。
如何进行血清灭活处理?血清请先按上述「血清应如何融解」中的操作步骤融化和混匀,热灭活时请将血清置于56℃水浴30分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。比较好准备同样的容器装相等体积的水(与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入56℃水浴,在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时轻轻旋转混匀血清,当温度计显示达到56℃左右,开始计时。56℃水浴后,建议马上转移到冰上降温。我们通过多次传代,分辨同细胞、同代次、不同血清样品培养的细胞形态间的细微差异。
颜色不同血清根据血红蛋白含量的不同,表现的颜色也不一样真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂,一般表现出微红色或橘红色;而新生牛(小牛)血清则表现为蜡黄色或偏黄色澄清度和粘稠度不同胎牛血清蛋白和脂类含量低,表现为稀薄、清淡新生牛(小牛)血清相比更加粘稠7.血清选择在这几类血清中,胎牛血清的品质无疑是比较高的,如果你的细胞比较娇贵难养,出现比较好的培养效果请选择胎牛血清;如果你的细胞比较易养,给点什么血清都能出现很好的效果,使用新生牛(小牛)血清就足够了。血清因为来源于动物,且血清的营养成分丰富,非常适合细菌、支原体等生长--云海生物。青岛羊血清采购平台
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决定血清的颜色的因素胎牛血清的颜色会根据血红蛋白(鲜红色)、胆红素(黄色)含量的不同而表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色。因胎牛血清为动物来源,同一品牌的不同批次间的胎牛血清颜色也会因为血红蛋白、胆红素含量的不同而有差异。造成血清沉淀较多的原因:①对血清进行了热灭活处理;②血清反复冻融;③血清长期4℃储存;④室温或者37℃融化血清;⑤长期室温储存。有关血清批间差异的疑问血清来源于动物,其组成成分有1000多种,血清成分的组成及含量受供体动物年龄、生理条件、营养条件而有差别。每个批次的血清成分百分比含量是不确定的,批间差异是存在的。尤其是一些较为难培养的敏感细胞,批间差异会表现得较为明显。济宁猪血清生产商
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