为什么血清中会有沉淀生成,主要成分是什么,会对实验有什么影响?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),胎球蛋白[1],脂蛋白,冷凝集素,玻连蛋白,磷酸钙(显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防:非必要,不用热灭活;避免反复冻融;-20℃保存;4℃全融(期间间断摇晃均匀);2000rpm离心5分钟(不建议用0.2um滤膜过滤),取上清使用。血清存在批间差吗?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。每个批号的组分和百分比含量都是不固定的,所以批间差异是存在的。建议先进行批号测试,筛选出合适批号,购买半年甚至一年以上的用量,避免批间差造成实验波动(胎牛血清在-20℃保存可达5年)。猪血清的价格相对较低,与其他动物血清相比具有较高的性价比。深圳动物血清
1、牛血清是细胞培养基重要成份之一。在培养基中加入适量血清(10%),首先可以补充细胞生长所需的生长因子、帖附因子等。2、具有祛毒作用,能解除脂肪酸、重金属和某些蛋白酶的毒性。3、它还能中止胰酶的作用,并保护细胞免受机械损伤等。但是血清成分复杂,不同来源、不同批号生产的血清对细胞生长作用的差异较大。血清的保存期只有一年,不同存放时期的血清的效力也不同。所以,当新购得的血清或要在开始一个重大试验的时候,应首先进行牛血清的筛选。重庆马血清采购平台胎牛血清能够提供丰富的营养,促进细胞的快速生长和分裂。
血清出现沉淀的问题:血清非人工产品,有些东西沉淀出来系自然现象;纤维蛋白原、盐析出,如磷酸钙等;胆固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情况下还会增加:热灭活、37℃培养(常常由此引发歧异)、反复冻融、熔化中没有摇匀、gamma照射、长期存放在2-8°C。另外我们还发现:血清加入到RPMI1640中时,沉淀往往会发生或增加:pH升高时,沉淀会增加;在培养板或培养皿中,因为培养基的蒸发也会导致沉淀的增加。如何避免血清中产生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
如何挑选适合细胞生长的血清?原代或是正常细胞株建议使用BI特级胎牛血清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用特级胎牛血清,或胚胎干细胞胎牛血清。由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清质量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。如何正确保存血清?需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。选择云海生物的胎新生牛血清,您将获得高质量的产品和专业的服务,为您的实验研究提供有力支持。
沉淀很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采集血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。胎新生牛血清是一种高质量的生物制品,具有极高的纯度和生物活性。福建马血清生产厂
猪血清是一种丰富的营养来源,含有多种必需的营养素,如蛋白质、矿物质和维生素。深圳动物血清
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的激l素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到祛毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报,或细胞类型或基础培养基的成分来确定相应浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质深圳动物血清