血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后,分离出的淡黄色透明液体(理论上)或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、各种生长因子、结合蛋白、促接触和生长因子,使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。其实,细胞培养从上个世纪开始发展至今,经历了多个阶段:1885年Roux生理盐水培育鸡胚组织;1903-1906年Jolly和Beebe等发明了悬滴培养;1907年Harrison培养蛙胚神经成功;1910、1912年Carrel完善了悬滴培养法;1923年Carral设计创立了卡氏瓶培养法;随后培养器具不断推陈出新,塑料瓶、皿、多孔培养板的使用逐渐普遍。在培养基方面也经历了巨大变革,天然培养基➡合成培养基鸡胚浸出液➡动物血清直至60年代出现无血清培养基。它们的效果十分重要,细胞需求它们组成核酸和蛋白质,缺少要导致细胞成长不良乃至死亡。湖南鸡血清多少钱
HI(热灭活)处理血清血清热灭活是通过提高血清温度到56℃,并保持该温度30Min完成,可以去除血清内补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。加热可以灭活补体系统。焕活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,焕活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究中培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活于血清。胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清经过细胞培养及其他测试筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。无锡牛血清哪家好在微生物的培育中要为培育的微生物供给成长因子。
何谓热灭活一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和焕活。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。
为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免该现象?在2~8°C条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在2~8°C条件下长时间放置。动物不同,分离出的血清也会有所不同。
血清的分类根据取血年龄的不同,血清有以下分类:取血牛龄主要受当地畜牧业发展情况及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专为取血而养的牛。01胎牛血清(FetalBovineSerum,简称FBS)取自尚未出生,母牛剖腹心脏穿刺取血得到的血清。02国产胎牛血清(并无准确定义,但通常以此命名)出生4-6小时,未进行哺乳进食的新生牛,也有称作国产新生牛血清。03新生牛血清(NewbornCalfSeurm,简称NBCS)也有称作小牛血清,指的是出生14天-90天的进行取血的牛血清(也有说是指出生10天-90天)。04成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指取血时牛龄超过6个月的牛血清。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。山东胎牛血清厂家
在一些情况下,中和毒性物质维护细胞不受损害。湖南鸡血清多少钱
佐剂由于不同个体对同一抗原的反应性不同,而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱,因此常常在注射抗原的同时,加入能增强抗原的抗原性物质,以刺激机体产生较强的免疫反应,这种物质称为免疫佐剂。佐剂除了延长抗原在体内的存留时间,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激网状内皮系统,使参与免疫反应的免疫活性细胞增多,促进T细胞与B细胞的相互作用,从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。常用的佐剂是福氏佐剂(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份羊毛脂与石腊油的比例,视需要可调整为1:2~9(V/V),这是不完全福氏佐剂,在每毫升不完全佐剂加入1~20mg卡介苗就成为完全佐剂。湖南鸡血清多少钱
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