在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,像是组成剪接体的snRNA,负责rRNA成型的snoRNA,以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等,可调节基因表达。而其他如I、II型内含子、RNaseP、HDV、核糖体RNA等等都有催化生化反应过程的活性,即具有酶的活性,这类RNA被称为核酶。在病菌方面,很多病菌只以RNA作为其中的遗传信息载体(有别于细胞生物普遍用双链DNA作载体)。当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题。广州正规RNA提取试剂厂家现货
RNA提取醇沉淀不是越多就越好。有些实验方案会推荐,在异丙醇沉淀后,用乙醇沉淀两次。实际上,任何提取实验,都会在纯度和得率这一对矛盾中取舍。醇沉淀会将脂溶性杂质去掉,但部分非脂溶性的杂质依然会连同RNA一起被沉淀下来。因此,多整几次,并不会让RNA的纯度翻倍,反而还会有降低得率的风险。一般情况下,异丙醇和乙醇各沉淀一次即可。但是,倘若预计RNA浓度很低,那就只能放弃纯度,在低温沉淀数小时,以换来较高的得率。围绕DEPC的玄学。许多实验方案会推荐使用0.1%DEPC处理RNA相关用水,以灭活RNase。这一点是要肯定的。不过,在使用DEPC的过程中,又充斥着一些玄学。高压灭菌后的DEPC水,会有一股“香甜”的味道。许多人会以为那是残留的DEPC而不敢用。实际上,这只是DEPC分解成CO2和乙醇后,产生的一些挥发性酯类副产物。青岛RNA提取试剂报价为了使这种酶对降解的影响较小化,较好在采集时就稳定好样本中的 RNA。
Trizol法是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,压制细胞释放出的核酸酶。虽然Trizol里面含有RNA酶压制剂的,1ml的Trizol一般较多只能裂解100mg的组织。但是如果组织过量,Trizol无法完全浸润组织无法完全裂解组织,多余组织内的RNA酶等物质会导致RNA的降解。这是RNA降解的很重要的原因。同时,由于RNA容易降解,在实验过程中一般都要求口罩的,避免组织的污染。同时选用的无RNA酶的进口泵头、EP管以及DEPC水,在提取过程中,一定要时刻提醒自已RNaseFree-RNaseFree-RNaseFree,实验就成功一半啦~
RNA提取试剂的选择:对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点,Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以轻松解决这个问题。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地从各种简单的植物组织材料(叶片、茎、幼苗等)、富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子等)、菌类提取高纯度的TotalRNA,适用范围普遍。按照标准流程,本试剂盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂~在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。
RNA组成结构:RNA和DNA一样,也是由各种核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接构成的多核苷酸链,但与DNA有一系列差异。1.在化学组成方面,RNA含核糖而不含脱氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每个tNA分子含有一个胸腺嘧啶,这是在RNA链合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少数DNA含有少量核糖,但这些个别的例外并不能以此否定两类核酸组成上的差异。2.RNA一级结构的概念虽与DNA相同.但其基本结构单位是核糖核苷酸而不是脱氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一级结构中没有DNA那样复杂的顺序组织。3.绝大多数RNA为单链分子,单链可自身折迭形成发夹(hairpin)样结构而有局部双螺旋结构的特征,这是各种RAN空间结构的共同特征。RNA局部双螺旋结构中碱基互补配对规律是A对U和G对C。由于RNA分子内部不能较全形成碱基配对,故其碱基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA碱基比例的Chargaff规律。很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。无锡RNA提取试剂销售厂家
试剂盒中的吸附柱采用特殊的硅基质膜材料。广州正规RNA提取试剂厂家现货
总RNA快速提取试剂盒背景资料;EpiQuik™总RNA分离快速试剂盒为从哺乳动物细胞和组织中分离总RNA提供了一种快速、简单和经济有效的方法。洗涤剂用于溶解细胞和灭活核糖核酸酶。特殊的高盐缓冲系统允许蛋白质/DNA被去除,RNA结合到自旋柱的玻璃纤维基质上,同时污染物通过柱。杂质被有效地冲洗掉,纯净的RNA被洗脱。该试剂盒纯化的RNA适用于多种常规应用,包括RT-PCR、cDNA合成、northernblotting、差异显示、引物延伸和mRNA选择。总RNA快速提取试剂盒描述:本试剂盒包含了直接从培养细胞或组织中成功分离RNA所需的所有试剂。经过裂解、结合和洗涤后,使用特殊设计的柱可以很容易地回收高达10个氧化格的RNA。然后,总RNA准备用于各种下游应用。广州正规RNA提取试剂厂家现货
RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。在细胞中,RNA种类繁多。根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依据DNA序列转录而成的蛋白质合成模板;tRNA是mRNA上遗传密码的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的场所。细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,像是组成剪接体(spliceosome)的snRNA,负责rRNA成型的snoRNA,以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等,可调节基因表达。rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的场所。...