PAS染色试剂配制及染色方法:1.材料与方1.1实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例,均来自我室实验材料。1.2主要试剂1.2.1AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液,其配方:无水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3过碘酸溶液0.5g过碘酸(HIO)溶于100mL蒸馏水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:过碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸钠0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4无色品红液(Schiff氏液)在三角烧内加入蒸馏水500mL,煮沸后,在保持微沸的情况下,加入碱性品红2.5g,并不断摇动约5min(勿使之沸腾),使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。冷却到50℃时,过滤,加入1N盐酸50mL,再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g,塞住瓶口,摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡),然后避光放置或冰箱内24h组织石蜡切片的染色检测。北京正规糖原染色试剂盒单价
GUS染色步骤:1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次,至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察,白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注:用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如,拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。山东如何使用糖原染色试剂盒哪里买在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。
PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置。
可以通过pas染色计算糖原含量吗:PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质.具体现象例举:阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深红色;中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒;单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒;少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒;正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色;巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色.巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色.颜色深浅与浓度相关~糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。湖南如何使用糖原染色试剂盒厂家批发价
过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。北京正规糖原染色试剂盒单价
特染的应用价值:现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益普遍,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术。北京正规糖原染色试剂盒单价
糖原染色用于鉴别淋巴系统细胞增生的性质鉴别红细胞系统增生的性质[英文缩写]PAS[参考值]正常人淋巴细胞PAS反应积分正常人幼红细胞PAS反应积分[临床意义]恶性淋巴瘤、急慢性淋巴细胞白血病时PAS积分升高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再障贫血时幼红细胞PAS反应多为阴性红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征时幼红细胞PAS反应积分可40甚至高达100--200以上用于不典型巨核细胞与李-斯细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性而后者反应为阴性或弱性。拥有千锤百炼的专业人才队伍,保证实验快速、有效的完成。糖原染色试剂盒哪里买糖原...