体外培养的上皮细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、、渗透压、pH等诸多方面的要求。一、营养成分维持细胞生长的营养条件一般包括以下几个方面:1、氨基酸:是细胞合成蛋白质的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸:缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸。此外还需要谷氨酰胺,它在细胞代谢过程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的来源,同样也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物质。体外培养的各种培养基内都含有必需氨基酸。2、单糖:培养中的细胞可以进行有氧与无氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。细胞对葡萄糖的吸收能力比较高,半乳糖比较低。体外培养动物细胞时,几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。3、维生素:主要扮演辅酶、辅基的角色,必不可少。生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12都是培养基常有的成分。4、无机离子与微量元素:细胞生长除需要钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素,还需要微量元素,如铁、锌、硒、铜、锰、钼、钒等。 上皮细胞培养基哪个性价比高?上海中乔新舟告诉您。安徽扁桃体上皮细胞培养基哪里有
生长培养基可控制培养体系的pH值,为培养的细胞缓冲pH值的变化。这种缓冲作用通常是通过添加有机缓冲盐(例如:HEPES)或者二氧化碳-碳酸氢盐缓冲盐实现。由于培养基的pH值取决于溶解态二氧化碳(CO2)与碳酸氢盐(HCO–)间的精密平衡,因此空气中二氧化碳含量的变化会改变培养基的pH值。为此,使用二氧化碳-碳酸氢盐缓冲盐培养基时必须使用外源性二氧化碳,特别是使用开放式培养皿培养细胞或者进行高浓度的转化细胞系培养时。虽然大多数研究人员通常使用浓度5–7%的二氧化碳,但是4–10%浓度的二氧化碳适用于大多数细胞培养实验。然而,每种细胞的培养条件不一,每种培养基均具有其推荐的二氧化碳压力和碳酸氢盐浓度,以便达到正确的pH值和渗透压;更多信息请参阅培养基制造商提供的说明书。 安徽扁桃体上皮细胞培养基哪里有上海中乔新舟 上皮细胞培养基的特点。欢迎来电咨询上海中乔新舟!
维生素是维持细胞生长的生物活性物质,在细胞代谢中起调节及控制作用。维生素可分为水溶性和脂溶性两类,水溶性维生素主要包括泛酸、维生素B12、叶酸、烟酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黄素、维生素C、胆碱、肌醇等;脂溶性维生素主要包括维生素A、D、E、K等;有的培养液中还直接采用ATP和辅酶A;大部分培养基中还有生物素。许多维生素参与构成各种酶的活性基团的成分,没有它们,酶便没有活性,代谢活动将无法进行。比如,泛酸可以在细胞内转变成酰基载体蛋白和辅酶(如辅酶A),参与糖类、脂类和蛋白质代谢中的催化反应;维生素B12则在细胞内参与叶酸的合成和脂肪酸的合成等。不同配方的细胞培养基中维生素的浓度有较大差异。例如,DMEM培养基中维生素的含量约为MEM培养基的两倍,其原因是一方面不同种类维生素的作用不同,另一方面不同种类的细胞对维生素的需求也可能有较大差异,相应细胞培养基的配方中维生素的含量也可能不同。
氮源(氨基酸)氨基酸在细胞内的重要生理作用主要体现在以下几个方面:①是蛋白质的基本组成单位,用于合成蛋白质和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸还具有独特的生理作用,如甘氨酸参与生物转化作用,丙氨酸和谷氨酰胺参与细胞内氨的运输等;④可转变成糖类和脂肪,参与氧化供能。细胞所能利用的氨基酸是L型同分异构体,D型氨基酸不能被利用。不同的细胞对氨基酸的需求各异,但有些必需氨基酸是细胞不能自身合成的,必须依靠外源的细胞培养液提供。其余非必需氨基酸,细胞可以自己合成,或通过转氨作用由其他物质转化而来,但是在细胞培养基中添加适当浓度的非必需氨基酸可以减轻细胞在合成方面的负担,提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。 上皮细胞培养基的规格介绍。欢迎来电咨询上海中乔新舟!
上皮细胞培养基上皮细胞培养基是专门为正常人类上皮细胞体外培养设计的适于其生长的培养基。是经灭菌的液体培养基,包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(2%)。该培养基缓冲体系为重碳酸盐,在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为。该培养基的配方能够选择性的促进正常人类上皮细胞体外培养中的增殖和生长,并为其达到理想营养平衡状态。上皮细胞培养基包含500ml基础培养基,10mll胎牛血清(FBS,)、5ml上皮细胞生长因子(EpiCGS,)、5ml青霉素/链霉素溶液(P/S,)。 上皮细胞培养基的排名。欢迎来电咨询上海中乔新舟!安徽扁桃体上皮细胞培养基哪里有
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细胞培养过程中pH值下降产生的原因有很多。在细胞生长非常快时,pH值通常下降得很快,此时可以通过及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外,培养瓶盖拧得过紧、NaHCO3缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、细菌、酵母或污染等也能导致pH值通常下降得很快。这时,可以通过以下几种方法解决:1)增加培养液中NaHCO3浓度或减少培养箱内CO2浓度。NaHCO3含量在;2)改用不依赖CO2培养液;3)适当松开瓶盖。在培养液中加HEPES缓冲液,使终浓度为10~25mM;4)在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hanks’盐配制的培养液;5)如果是污染造成的则丢弃培养物或用除菌。 安徽扁桃体上皮细胞培养基哪里有
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