北京数字PCR简介

数字PCR也叫DigitalPCR（dPCR），是近几年发展起来的一种核酸定量分析技术。相较于传统荧光定量PCR来说，数字PCR对结果的判定不依赖于扩增曲线循环Ct值，不受扩增效率的影响，能够直接读出DNA的分子个数，能够对起始样本核酸分子***定量。数字PCR基本原理是将一个样本分成几十到几万份，然后再将其分配到不同的反应单元中，使每个微滴单元包含一个或多个拷贝的核酸分子（即DNA模板），每个单元都会对目标分子进行扩增，然后再对每个单元进行荧光信号的统计并计算。相对而言，传统PCR或qPCR反应都是发生于同一体系当中，这也是数字PCR与其比较大的区别。 分辨率——低至0.1倍基因表达差异。北京数字PCR简介

与常规PCR方法相比，数字PCR有如下优势：1、能够完全定量：常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线，但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系，条件上会存在差异，另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响，可进行完全定量。2、样本需求量低：适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本3、灵敏度高：数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个 PCR反应，这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。4、高耐受性：由于目的序列被分配到多个 反应体系中，明显降低了背景信号和yìzhì物对反应的干扰，扩增基质效应大大减小。无锡永诺数字PCR品牌液体活检：早筛、用药、监测、复发。

在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是***定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digitalPCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的***定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。

数字PCR的应用检验检疫食品安全•转基因食品检测（国标）•病原菌鉴定•动物源性检测分析科研•基因表达差异监测•CRISPR-Cas9基因编辑结果验证•甲基化含量鉴定•单细胞研究：测序、PCR临床•**液体活检：早筛、用药、监测、复发•无创产前筛查：低成本、快速•***性疾病：HBV、HIV定量据悉，MiniDrop™**团队由微流控、光学、机电学、化学、临床医学、分子生物学等多学科交叉领域的**组成，依托精密仪器研发、生物纳米材料与分子生物学等平台，以微滴式数字PCR仪为**，打造了全自动液体处理工作站、核酸提取试剂盒等创新产品，致力于解决**、***领域的精细诊断。正压生成油包水的液滴。

MicroDrop-100数字PCR系统具有如下优点：

1、JUE对定量，结果判读不需要依赖标准曲线；

2、突破局限，检测灵敏度可低至万分之一；

3、专利设计的具有高精度复杂三维微纳防污染结构的微流控芯片，单张可同时处理1-8个样本；

4、一键式自动操作，20uL PCR体系可生成100,000微滴，8个样本单次微滴生成*需2分钟；

5、FAM、HEX（VIC）双荧光通道，半导体激光器做为激发光源相比LED光源，稳定性高，功率稳定不影响检测灵敏度，单色性能优异降低对检测特异性的影响，且方向性好；

6、检测器为2个光电倍增管，灵敏度及增益优于MPCC或CCD,普通的硅光子计数器，增益为10^5，光电倍增管增益可以达到10^9；

7、**知识产权的软件系统可直接计算拷贝数、拷贝数浓度，CNV 值，突变丰度；阈值线可自动或手动完成，每个样本可单独设定阈值线；输出数据图标、直方图、一维图、二维图、浓度图、95%置信度不确定性区间等；软件可自动识别复杂微滴分簇四簇；软件具备数据质控功能，支持阳性微滴数、阴性微滴数、总微滴数统计及这些指标的任意组合；单个样本100,000微滴的反应体系以及高灵敏度的检测系统，配以独特的软件系统，可以实现高达20重的PCR分析；

8、单次检测通量96个样本，操作灵活； 双通道荧光检测，支持EvaGreen染料及探针法。北京永诺数字PCR

样本多样性，样本通量可达96个样本，支持灵活设定。北京数字PCR简介

MicroDrop-100微滴式数字PCR是具有国内自主知识产权的第三代JUE对定量PCR系统，整套系统由MicroDrop-100A微滴生成仪、MicroDrop-100B微滴检测仪以及结果数据分析设备等构成。系统通过自主设计的微流控芯片，利用油水相不兼容的原理，在2分钟时间内将PCR体系分割成100,000油包水的体系，每个体系为 的PCR反应体系，体积约为0.2nL，单次实验一次可生成8个样本的油包水体系。由于油包水体系的分割效应，使得数字PCR受PCRYi制物的影响相对较小，有利于复杂环境样本的实验操作。区别于荧光定量PCR的过程性判读方法，数字PCR结果判读为终点法，故其对PCR扩增效率的依赖也相对较小。北京数字PCR简介

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