外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——超高速离心法。其中超高速离心法是常用的,该方法是被誉为分离外泌体的“金标准”。因操作简单,不需要复杂的技术支持,并且成本相对较低而被广fan使用。但是该方法耗时、产率低,得到的外泌体的数量和质量很大程度上受转子的类型、转子沉降角度等因素影响,其中主要的问题就是差速离心法获得的沉淀物是外泌体,但也会有其他的囊泡、蛋白质或蛋白和RNA的聚集体。所以得到的外泌体的纯度和产量都不高。载药的外泌体提纯以后一般会通过静脉注射、皮下注射、腹膜内注射或者中流处注射等方式进行疾病zhiliao。甘肃外泌体载药纳米的制备方法
PTX是一种天然的抗中流药物, 已在临床上广fan应用, 但因其句有剂量依赖性毒性、水溶性差和静脉注射zhiliao效果较差等问题限制了PTX使用。在异种中流移植的裸小鼠肺ai模型中, 使用牛奶来源的外泌体作为PTX的药物载体, 经口服给药结果显示, 负载PTX的外泌体句有良好的耐酸性和稳定性, 能明显抑制中流的生长, 并且较静脉给药明显降低了药物本身毒性与免疫反应。有实验利用超声引导巨噬细胞来源外泌体装载PTX, 发现外泌体载药组较传统给yao方式对P-gp阳性耐药细胞的细胞毒性增加了50倍以上, 对Lewis肺ai自发转移模型句有很强的杀伤作用, 说明以外泌体为载体的PTX句有改善化疗药物耐药性, 增强抗ai效果的潜能。河南组织样本外泌体载药实验参考价格对于水溶性的药物可用电穿孔的方法将药物载入外泌体中。
外泌体载带蛋白质药物的方法包括直接和间接两种载yao方式。间接载yao方式是目前实现外泌体载带目标蛋白质的主要方法，通过基因工程使目标蛋白质核酸转染供体细胞，待供体细胞表达目标蛋白质后，分离纯化其培养基，得到载带有目标蛋白质的外泌体递送系统。主要缺点是载药周期长、载药量和载药过程不可控，在一定程度上限制该方法在构建外泌体递送系统上的应用；直接载yao方式是指不涉及外泌体供体细胞，直接通过某种化学或物理作用将外源性蛋白质载入外泌体中的方法。因周期短、操作简单、过程可控等优点，成为一种极句前景的研究方法。
外泌体递送系统的靶向给yao方式分为被动靶向和主动靶向两种。被动靶向给药，多采用局部给yao方式实现，包括局部注射、鼻腔给药、生物材料局部植入等。主动靶向给药的相关研究很少见。jin有YUAN等人利用血一脑屏障在病理和生理条件下的特性，实现载带脑源性神经营养因子的外泌体递送系统在全身给药条件下脑部主动靶向。因被动靶向的靶向效率明显低于主动靶向，且临床实际更需要的是可以实现精zhun靶向给药、减少非靶组织和qi官伤害的主动靶向给药，故载带外源性蛋白质外泌体主动靶向给药将是研究的主要方向。姜黄素装载在牛奶来源的外泌体经口服方式可以有效地调控靶细胞。
影响外泌体载药效率的因素有许多：1外泌体的分离与纯化：目前，准确和标准的外泌体纯化方法较少，使用不同方法获得的外泌体其收率与纯度差别较大，需要根据研究目的不同选择适当的分离方法，超速离心法是外泌体纯化常用的手段，低速离心和高速离心交替进行的方法通常用于从大量样品中分离外泌体，但获得的外泌体纯度不高。外泌体的收率过低与低纯度会影响其对药物包载效率，难以实现大批量生产。2包载方法：根据包载药物的分子极性、相对分子质量及自身所带电荷等性质选择不同的包载方法。不同包载方法对于同一种药物的包载效率可能完全不同。相同剂量的PTX，PTX-M1-Exos载药体系和游离的PTX相比，对小鼠乳腺ai4T1的抑制率更高。甘肃外泌体载药纳米的制备方法
外泌体成分复杂，未装载药物的外泌体可能促进供体中流细胞的增殖。甘肃外泌体载药纳米的制备方法
细胞外囊泡（EVs）因其生物相容性、大小适宜、体循环中保存时间长和低免疫原性等优势，在生物医学应用中得到了普遍的应用。研究发现EV比普通的细胞膜囊泡更有优势。EV的优势在于，由于其表面的跨膜蛋白（如MHC复合物）数量减少，它们的免疫原性低于其宿主细胞膜，具体的多少取决于它们的细胞来源。凋亡小体、微泡和外泌体是根据EV的生物成因进行分类的。当胞内体的膜向内萌发形成外泌体时，就产生多泡体（MVB）。当MVBs与质膜融合时，外泌体被释放到细胞外空间。一旦从细胞表面释放出来，外泌体能够与细胞外基质相互作用，或在微环境内外引发反应。将RNA和蛋白质引入外泌体，并将其定向到身体特定区域的方法仍在开发中。外泌体被认为是一种合适的药物传递系统，因为蛋白质和遗传物质都可以装载到其中。 甘肃外泌体载药纳米的制备方法
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