福建组织外泌体提取

外泌体中存在着某些特定的蛋白质、脂质和多糖, 基于抗原–抗体特异性识别和结合作用原理, 可将外泌体从其他组分中分离出来。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜联蛋白、上皮细胞黏附分子或肝素等都可以作为抗原, 而捕获外泌体的抗体可以附着在平板、磁珠、二氧化硅、树脂、膜亲和过滤器、纤维素滤膜、聚酰氨基胺树状聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶联免疫吸附法和磁珠法等。酶联免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作为抗体附着介质, 其结果用吸光度值表示, 该方法可以快速分析已知表面生物标志物的表达, 也可以瞬时读出外泌体的产量和特异性。磁珠法多使用共价包覆链霉亲和素的磁珠, 与样品一起孵育后可通过磁泳将被结合的外泌体从样品组分中分离出来。鉴于微米级磁珠可赋予更大的接触面积, 该方法不jin具有高度特异性, 还具有比超速离心更高的外泌体产率。外泌体的异质性决定了外泌体药物递送系统要根据所传递治理物质的类型、目标组织的特点等进行针对性的调整。福建组织外泌体提取

外泌体能携带多种生物活性分子循环于血液／体液中并介导长距离的细胞间通讯，中流来源外泌体富含的蛋白质、核苷酸、脂质等分子能够反映其来源细胞的生理及病理状态，外泌体特殊的脂质双分子层结构能保护其内RNA等分子免于降解，因此，检测中流外泌体成为液体活检一个明显优势。临床试验研究表明，外泌体在多种疾病的早期诊断、疗效和预后监测等方面都具备较好的应用价值，正逐渐成为临床诊疗中新的、理想的生物标志物和可能的靶向药物载体。随着技术的进步，组学时代的到来，大规模蛋白质组学已经被联合应用于筛选和揭示多种ai症细胞外囊泡的标志物。河南细胞上清外泌体透射电镜检测外泌体膜蛋白可以与靶细胞膜蛋白结合，进而唤醒靶细胞细胞内的信号通路。

外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断, 是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡, 且有较长的循环半衰期, 可用于免疫学相关研究, 同时, 源自ai细胞的外泌体可以被工程化, 发挥免疫刺激作用, 可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外, 外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中, 具有低免疫原性、高耐受性等特点, 且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障, 因此可用作组织和qi官特异药物输送系统, 兼有高输送效率和低副作用。因此, 外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质, 运送至靶位点后实现靶向zhiliao。

前列腺ai患者尿液外泌体中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表达水平明显上升，表明这些miRNAs可用于前列腺ai的早期筛查。胆管ai是恶性程度较高的消化系统中流，发展隐蔽且临床症状及体征出现晚，故给早期诊断带来困难。高通量小RNA测序筛查了来自胆管ai和胆囊ai患者外泌体中一系列差异表达的miRNA，小RNA长度在正常个体、胆管ai患者和胆囊ai患者之间的分布存在明显差异，胆管ai患者的外泌体中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明显升高，而胆囊ai患者的外泌体中miR-151a-5p略有升高，为胆管ai和胆囊ai提供了一套新的生物诊断标志物。作为抗ai类和抗yan症类药物载体，外泌体可较好地保护药物免遭人体清chu。

唾液中包含来自于唾液腺上皮体外细胞的外泌体，Michael等从唾液中提取外泌体，并对唾液外泌体中的miRNA进行分析，发现此类miRNA有望作为成为唾液腺疾病的生物标志物。Wu等成功从汗液中提取得到外泌体，并进行蛋白质组学分析，在汗液外泌体中鉴定到1062种蛋白质，其中包含多种抗jun肽和免疫因子，表明汗液外泌体参与皮肤免疫。Liu等从患有阿尔兹海默症患小鼠的脑脊髓液中提取得到外泌体，并与野生型小鼠进行对比，发现实验组miR-193b明显下调。外泌体特主要来源于细胞内多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。黑龙江外泌体lncRNA芯片

外泌体miR-151a可以预测GBM对替莫唑胺的化疗反应，且有希望成为难治性GBM的zhiliao靶点。福建组织外泌体提取

circZKSCAN1在肝ai细胞中低表达且抑制肝ai细胞的增殖，ciRS-7则被认为是非小细胞肺ai、结肠ai和胃ai等中流的预后指标，其高表达与较高的临床分期和较差的总体生存期相关。目前已发现组织、血液和外泌体中的circRNA分子表达失调，而多种circRNA的联合检测会提高外泌体标志物的敏感性和特异性，甚至可达到90％左右。外泌体可作为纳米载体来介导细胞间的信息传递，发挥信息传递作用的方式主要有：在细胞间转移受体，通过配体受体介导的方式作用于受体细胞，向受体细胞转移功能蛋白，通过膜融合方式向受体细胞传递mRNA、miRNAs或转录因子等信息。这些方式为中流靶向zhiliao开辟了新的途径。福建组织外泌体提取

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